[發明專利]一種制備雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素的方法有效
| 申請號: | 201810117628.8 | 申請日: | 2018-02-06 |
| 公開(公告)號: | CN108191948B | 公開(公告)日: | 2019-04-02 |
| 發明(設計)人: | 賴旭宇 | 申請(專利權)人: | 海門市彼維知識產權服務有限公司 |
| 主分類號: | C07J73/00 | 分類號: | C07J73/00 |
| 代理公司: | 長沙新裕知識產權代理有限公司 43210 | 代理人: | 趙超 |
| 地址: | 226152 江蘇省*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 雷公藤 硅膠柱層析 制備 雷公藤內酯酮 雷公藤甲素 手性異構體 大孔樹脂 分離難度 有效分離 常規的 異構體 重現性 柱色譜 溶劑 | ||
1.一種制備雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素的方法,其特征在于,包括如下步驟:
步驟S1,提取:將衛矛科植物雷公藤的干燥根粉碎,乙醇溶液冷浸提取,回收提取液中的乙醇并用水稀釋,過濾,收集濾液作為大孔樹脂上樣液;
步驟S2,XDA-1B大孔吸附樹脂富集:以XDA-1B大孔吸附樹脂為分離介質并裝柱,樹脂徑高比為1:10,拌樣樹脂占樹脂總量的1/10,濕法裝柱,拌樹脂上樣;先用12BV的35%乙醇以12BV/h的流速清洗,后用8BV含有體積百分含量為萬分之一的三乙胺的75%乙醇以12BV/h的流速洗脫并收集5-8BV洗脫液;將收集的洗脫液濃縮至干即得粗品;
步驟S3,堿開環酸閉環精制:將步驟S2所得粗品使用pH值為9.5的堿水溶解,過濾去除不溶物,濾液再用酸調節pH值至6.5,低溫析晶,過濾收集析出物,洗滌、干燥,用含有體積百分含量為萬分之一的三乙胺的65%乙醇溶解作為上樣液;
步驟S4,DM130大孔吸附樹脂分離:以DM130大孔吸附樹脂為分離介質并裝柱,樹脂徑高比為1:20,拌樣樹脂占樹脂總量的1/20,濕法裝柱,拌樹脂上樣;用6BV含有體積百分含量為萬分之一的三乙胺的65%乙醇以4BV/h的流速洗脫并收集5-6BV洗脫液,濃縮干燥即得雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素混合物;
步驟S5,高速逆流色譜分離:以體積比為4:1:3:0.01的乙酸乙酯-正丁醇-水-冰醋酸為溶劑體系,以其上相為固定相,下相為流動相;將步驟S4所得雷公藤乙素和2-表雷公藤乙素混合物用等體積固定相和流動相溶解,濾過,作為樣品溶液;轉速為850r/min,流動相流速為2.5mL/min,檢測波長為220nm,根據色譜圖收集雷公藤乙素、2-表雷公藤乙素色譜峰對應的洗脫液,濃縮干燥即得雷公藤乙素、2-表雷公藤乙素。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟S1提取的固液比為1:5,1kg干燥根對應用5L的乙醇溶液冷浸提取。
3.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于:步驟S1用95%乙醇冷浸提取。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟S1回收提取液中的乙醇后用水稀釋至0.5g生藥/mL,過濾,收集濾液作為大孔樹脂上樣液。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟S2拌樣樹脂質量為上樣液對應生藥質量的1/2;步驟S4拌樣樹脂質量為上樣液對應析出物質量的1/2。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟S3堿水為氨水溶液。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟S3酸為鹽酸。
8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟S3低溫析晶的溫度為4℃。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟S3用含有體積百分含量為萬分之一的三乙胺的65%乙醇溶解成0.5g/mL溶液作為上樣液。
10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟S5樣品溶液的濃度為10mg/mL。
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