[發明專利]熒光探針、熒光檢測方法及熒光探針的使用方法在審
| 申請號： | 201780026210.X | 申請日： | 2017-02-10 |
| 公開（公告）號： | CN109073556A | 公開（公告）日： | 2018-12-21 |
| 發明（設計）人： | 林幸一朗;坂本涉;余語利信;丸岡弘規 | 申請（專利權）人： | 國立大學法人名古屋大學;倉敷紡績株式會社 |
| 主分類號： | G01N21/64 | 分類號： | G01N21/64;G01N15/14;G01N21/78;G01N33/48;G01N33/53;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 永新專利商標代理有限公司 72002 | 代理人： | 王靈菇 |
| 地址： | 日本*** | 國省代碼： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 熒光色素 熒光探針 熒光 熒光標記細胞 目標細胞 熒光檢測 載體分子 體內 熒光探針標記 流式細胞儀 熒光顯微鏡 成像裝置 激發波長 體內熒光 熒光標記 激發光 分選 觀察 照射 細胞 移植 | ||
1.一種熒光探針，其特征在于，在包含載體分子、和與所述載體分子結合的熒光色素a和熒光色素b的熒光探針中，熒光色素a的激發波長與熒光色素b的激發波長不同、并且在熒光色素a與熒光色素b之間不產生熒光共振能量移動。
2.根據權利要求1所述的熒光探針，其中，所述熒光探針為細胞標記用熒光探針，熒光色素a為體外熒光成像用熒光色素，熒光色素b為體內熒光成像用熒光色素。
3.根據權利要求1或2所述的熒光探針，其通過特異性結合于細胞表面來標記細胞。
4.根據權利要求1或2所述的熒光探針，其通過被攝入到細胞內部來標記細胞。
5.根據權利要求1～4中任一項所述的熒光探針，其中，熒光色素a的激發波長為350～650nm的范圍。
6.根據權利要求1～5中任一項所述的熒光探針，其中，熒光色素b的激發波長為600～850nm的范圍。
7.根據權利要求1～6中任一項所述的熒光探針，其中，熒光色素a為卟啉。
8.根據權利要求1～7中任一項所述的熒光探針，其中，熒光色素b為吲哚菁綠。
9.根據權利要求1～8中任一項所述的熒光探針，其中，所述載體分子為聚硅氧烷。
10.根據權利要求2～9中任一項所述的熒光探針，其用于利用流式細胞儀進行的熒光標記細胞的分選。
11.一種檢測目標細胞的熒光檢測方法，其特征在于，其包含：
用熒光探針對目標細胞進行標記的工序，和
向用熒光探針標記的目標細胞照射激發光，觀察來自熒光探針的熒光的工序，
其中，所述熒光探針包含載體分子、和與所述載體分子結合的熒光色素a及熒光色素b，熒光色素a的激發波長與熒光色素b的激發波長不同，并且在熒光色素a與熒光色素b之間不產生熒光共振能量移動。
12.根據權利要求11所述的熒光檢測方法，其中，熒光色素a為體外熒光成像用熒光色素，熒光色素b為體內熒光成像用熒光色素。
13.根據權利要求11或12所述的熒光檢測方法，其中，對用熒光探針標記的目標細胞照射激發熒光色素a的激發光，通過體外熒光成像觀察來自熒光探針的熒光。
14.根據權利要求11或12所述的熒光檢測方法，其中，將用熒光探針標記的目標細胞移植到生物體內，向該生物體照射激發熒光色素b的激發光，通過體內熒光成像觀察來自熒光探針的熒光，所述生物體除外人體。
15.根據權利要求11～14中任一項所述的熒光檢測方法，其中，所述熒光探針通過特異性結合于細胞表面來標記細胞。
16.根據權利要求11～14中任一項所述的熒光檢測方法，其中，所述熒光探針通過被攝入到細胞內部來標記細胞。
17.根據權利要求11～16中任一項所述的熒光檢測方法，其中，熒光色素a的激發波長為350～650nm的范圍。
18.根據權利要求11～17中任一項所述的熒光檢測方法，其中，熒光色素b的激發波長為600～850nm的范圍。
19.根據權利要求11～18中任一項所述的熒光檢測方法，其中，熒光色素a為卟啉。
20.根據權利要求11～19中任一項所述的熒光檢測方法，其中，熒光色素b為吲哚菁綠。
21.權利要求1～10中任一項所述的熒光探針的使用方法，其特征在于，其包含：
用熒光探針對細胞進行熒光標記的工序，
利用流式細胞儀或熒光顯微鏡確認用熒光探針進行了熒光標記的熒光標記細胞并進行分選的工序，
將分選出的熒光標記細胞移植到生物體內的工序，所述生物體除外人體，和
利用體內熒光成像裝置觀察生物體內的熒光標記細胞的工序，
其中，所述利用流式細胞儀或熒光顯微鏡進行的熒光標記細胞的分選通過檢測來自熒光色素a的熒光來進行，所述生物體內的熒光標記細胞利用體內熒光成像裝置進行的觀察通過檢測來自熒光色素b的熒光來進行。
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