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[發明專利]遺傳物質的保存微粒及長期保存方法在審

專利信息
申請號: 201711103478.7 申請日: 2017-11-10
公開(公告)號: CN107916263A 公開(公告)日: 2018-04-17
發明(設計)人: 刁曉荃;丁士友;竇本銀 申請(專利權)人: 刁曉荃;丁士友;竇本銀
主分類號: C12N15/10 分類號: C12N15/10
代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司11219 代理人: 楊青,穆德駿
地址: 102206 北*** 國省代碼: 北京;11
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 遺傳物質 保存 微粒 長期 方法
【說明書】:

技術領域

發明涉及遺傳物質領域,具體涉及遺傳物質的保存微粒及長期保存方法。

背景技術

遺傳物質是指親代與子代之間傳遞遺傳信息的物質,主要包括DNA和RNA,其為每一個生物個體、包括動物、植物和微生物所特有。DNA技術已經廣泛應用于生物醫學、農業、環境、材料、刑偵、信息保存等領域。RNA在特定時間由生物體基因(DNA)轉錄而來,用于翻譯生命活動所需的蛋白。RNA的研究在農牧、醫學等方面也有著十分廣泛的前景,除了研究動植物的發育、生理調節等外,還可以用于疾病的診斷和治療。比如保存一個健康人的RNA,可用于本人或有遺傳關聯的直屬親屬的疾病診斷和治療。比較一個生物體不同時間的基因表達(RNA測序)可以研究未知基因的功能,特定基因的調節作用機制等。

遺傳物質的提取是一種成熟和常用的方法。提取遺傳物質并將其保存,在需要時進行釋放和凈化,并通過PCR技術進行擴增,便可以方便地利用保存的遺傳物質。因此,如何實現遺傳物質的保存、尤其是長期穩定的保存變得越來越受關注。

通常而言,DNA和RNA分子可以選擇低溫保存,例如絕大多數生物實驗室都將DNA或RNA分子保存于-80℃低溫冰箱或液氮中,保存方法簡便。然而,這種方法也有多種缺陷:一方面,遺傳物質只能保存在具有特種保存設備的專業機構,對其保存地點提出了較高要求,無法實現個人常規保存;另一方面,低溫保存面臨較為昂貴的后期維護成本,如果需要較長期保存的話費用較高;再一方面,由于受到氧化、電離輻射、紫外線、溫度升高以及核酸酶等多種因素的影響,低溫保存只適合于遺傳物質的中短期保存,例如數月、數年或數十年,更長期保存時遺傳物質仍有可能受到破壞。

自然界中,科學家從2-3千萬年前的琥珀包裹的微生物孢子(P.Setlow,Trends Microbiol.,2007,15,172.;R.J.Cano and M.K.Borucki,Science,1995,268,1060.)和1.2-1.35億年前的象鼻蟲(Cano et al.,Amplification and sequencing of DNA from a 120-135-million-year-old weevil,Nature 363(6429):536-8)提取到了DNA,證明遺傳物質的超長期保存是有可能實現的。目前,許多科學家也正在研究長期保存DNA的方法,比如:1)將DNA吸附在濾紙或多孔的材料中(Choy,J.H.,Oh,J.M.,Park,M.,Sohn,K.M.&Kim,J.W.Inorganicbiomolecular hybrid nanomaterials as a genetic molecular code system.Adv.Mater.16,1181–1184(2004).;Burgoyne,L.A.Solid medium and method for DNA storage.US patent 5,496,562(1988);Taylor,D.J.,Finston,T.L.&Hebert,P.D.N.The 15%solution for preservation.Trends Ecol.Evol.9,230(1994).;Yang,H.et al.Adsorption and protection of plasmid DNA on mesoporous silica nanoparticles modified with various amounts of organosilane.J.Colloid Interface Sci.369,317–322(2012).;Kapusuz,D.&Durucan,C.Synthesis of DNA-encapsulated silica elaborated by sol-gel routes.J.Mater.Res.28,175–184(2013).;Pierre,A.,Bonnet,J.,Vekris,A.&Portier,J.Encapsulation of deoxyribonucleic acid molecules in silica and hybrid organic-silica gels.J.Mater.Sci.Mater.Med.12,51–55(2001).),但這些方法沒有將DNA與外界環境分開,保存時間有限;2)將DNA包裹在玻璃材料中(Daniela Paunescu,Michela Puddu,Justus O B Soellner,Philipp R Stoessel&Robert N Grass.Reversible DNA encapsulation in silica to produce ROS-resistant and heat-resistant synthetic DNA‘fossils’.Nature Protocols,2013,8(2):2440-2448.;D.Paunescu,C.A.Mora,M.Puddu,F.Krumeich and R.N.Grass,DNA protection against ultraviolet irradiation by encapsulation in a multilayered SiO2/TiO2assembly.J.Mater.Chem.B,2014,2,8504-8509),這種方法使得DNA保存時間大為延長。然而,使用二氧化硅層包覆后DNA仍然會受到電離或光降解等影響;納米二氧化鈦比納米二氧化硅多了較強的紫外線屏蔽作用,可以防止紫外線對DNA和RNA的損傷,但其具有強親水性,同樣不利于DNA和RNA的長期保存。

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