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[發明專利]一種具有高ACE抑制活性的棉籽蛋白多肽及其制備方法在審

專利信息
申請號: 201711000146.6 申請日: 2017-10-24
公開(公告)號: CN107557422A 公開(公告)日: 2018-01-09
發明(設計)人: 高丹丹;陳士恩;田曉靜;李明生;丁功濤 申請(專利權)人: 西北民族大學
主分類號: C12P21/06 分類號: C12P21/06;C07K1/30
代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司36115 代理人: 劉華
地址: 730000 甘*** 國省代碼: 甘肅;62
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 具有 ace 抑制 活性 棉籽 蛋白 多肽 及其 制備 方法
【權利要求書】:

1.一種具有高ACE抑制活性的棉籽蛋白ACE抑制肽,其特征在于:制備方法為:

(1)脫酚棉籽粕粉按料液比為1:25(g/mL)加入蒸餾水,用1mol/L NaOH溶液調節體系pH值至11.5,在50℃下浸提2h,然后6000r/min離心15min,分離得上清液,用1mol/L的鹽酸溶液調節上清液的pH值至等電點4.3,再10000r/min離心15min,得到蛋白質沉淀,經透析、真空冷凍干燥得到棉籽蛋白質干粉;

(2)棉籽蛋白質干粉配成質量分數為5%的棉籽蛋白質溶液,調節pH值至7.5,加入木瓜蛋白酶(30000U/mL,E/S=1.2%),43.5℃下水解4h,然后95℃水浴滅酶15min,再加入4ml質量分數為10%的三氯乙酸TCA,10000r/min離心15min(沉降酶蛋白和未酶解的棉籽蛋白質),收集上清液,真空冷凍干燥得到棉籽蛋白ACE抑制肽;

(3)將棉籽蛋白ACE抑制肽用蒸餾水配制成底物濃度為10%的懸浮液,按酶與底物濃度比為2000.11U/g的比例加入木瓜蛋白酶,再按0.5mol/mol棉籽蛋白ACE抑制肽游離氨基的外源氨基酸比例加入亮氨酸,調節pH值至7.5,30℃恒溫水浴5h,95℃水浴滅酶15min,冷卻至室溫,10000r/min離心15min,收集上清液,真空冷凍干燥,即得。

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