[發明專利]一種具有高ACE抑制活性的棉籽蛋白多肽及其制備方法在審
| 申請號: | 201711000146.6 | 申請日: | 2017-10-24 |
| 公開(公告)號: | CN107557422A | 公開(公告)日: | 2018-01-09 |
| 發明(設計)人: | 高丹丹;陳士恩;田曉靜;李明生;丁功濤 | 申請(專利權)人: | 西北民族大學 |
| 主分類號: | C12P21/06 | 分類號: | C12P21/06;C07K1/30 |
| 代理公司: | 南昌新天下專利商標代理有限公司36115 | 代理人: | 劉華 |
| 地址: | 730000 甘*** | 國省代碼: | 甘肅;62 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 具有 ace 抑制 活性 棉籽 蛋白 多肽 及其 制備 方法 | ||
1.一種具有高ACE抑制活性的棉籽蛋白ACE抑制肽,其特征在于:制備方法為:
(1)脫酚棉籽粕粉按料液比為1:25(g/mL)加入蒸餾水,用1mol/L NaOH溶液調節體系pH值至11.5,在50℃下浸提2h,然后6000r/min離心15min,分離得上清液,用1mol/L的鹽酸溶液調節上清液的pH值至等電點4.3,再10000r/min離心15min,得到蛋白質沉淀,經透析、真空冷凍干燥得到棉籽蛋白質干粉;
(2)棉籽蛋白質干粉配成質量分數為5%的棉籽蛋白質溶液,調節pH值至7.5,加入木瓜蛋白酶(30000U/mL,E/S=1.2%),43.5℃下水解4h,然后95℃水浴滅酶15min,再加入4ml質量分數為10%的三氯乙酸TCA,10000r/min離心15min(沉降酶蛋白和未酶解的棉籽蛋白質),收集上清液,真空冷凍干燥得到棉籽蛋白ACE抑制肽;
(3)將棉籽蛋白ACE抑制肽用蒸餾水配制成底物濃度為10%的懸浮液,按酶與底物濃度比為2000.11U/g的比例加入木瓜蛋白酶,再按0.5mol/mol棉籽蛋白ACE抑制肽游離氨基的外源氨基酸比例加入亮氨酸,調節pH值至7.5,30℃恒溫水浴5h,95℃水浴滅酶15min,冷卻至室溫,10000r/min離心15min,收集上清液,真空冷凍干燥,即得。
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