1.一種同時分析短鏈、中鏈和長鏈酰基輔酶A的方法，其特征在于：

第一步：使用甲醇-氯仿-水雙相體系提取新鮮生物組織中的?；o酶A，其中甲醇、氯仿和水的體積比為2.5:2.5:1；

第二步：離心后，移取上層清液，并將上層清夜冷凍干燥；

第三步：使用甲醇-水的混合溶劑作為復(fù)溶溶劑將凍干提取物溶解；

第四步：使用在線二維液相色譜-質(zhì)譜系統(tǒng)同時分析短鏈、中鏈和長鏈?；o酶A；

第四步使用弱堿性條件分析短鏈?；o酶A，流動相A1為水，其中含有終濃度10-20 mM甲酸銨和0.05-0.1 wt.%氨水，流動相B1為乙腈/水，乙腈與水的體積比為95:5，其中含有終濃度10-20 mM甲酸銨和0.05-0.1 wt.%氨水；使用強堿性條件分析中鏈和長鏈酰基輔酶A，流動相A2為水，其中含有終濃度0.2-0.6 wt.%氨水，流動相B2為乙腈，其中含有終濃度0.2-0.6 wt.%氨水；分離過程采用梯度洗脫，其中流動相B1從3%升至100%，B2從10%升至100%；

在線二維液相色譜-質(zhì)譜分析系統(tǒng)使用C18色譜柱作為第一維預(yù)分離柱，旨在將短鏈?；o酶A和中鏈、長鏈?；o酶A分離，得到兩個餾分；選擇C6:0-?；o酶A作為兩個餾分的邊界；定義在C6:0-?；o酶A之前流出的為短鏈?；o酶A，在C6:0-酰基輔酶A與C12:0-酰基輔酶A之間流出的為中鏈酰基輔酶A，在C12:0-?；o酶A之后流出的為長鏈?；o酶A；第二維為平行柱分析系統(tǒng)，使用T3色譜柱分離短鏈?；o酶A，使用C18色譜柱分離中鏈和長鏈?；o酶A；

所述的在線二維液相色譜-質(zhì)譜分析系統(tǒng)，其分離過程包括餾分分離、短鏈?；o酶A分析、中鏈和長鏈酰基輔酶A分析、溶劑替換四個步驟，具體如下：

初始時，八通閥（11）的3號位與4號位相連，十通閥（25）的15號位與16號位相連，六通閥（34）的28號位與33號位相連；液相色譜泵1（1）的輸出端經(jīng)過自動進樣器（2）與八通閥（11）的3號位相連，八通閥（11）的4號位通過管線與十通閥（25）的15號位相連，十通閥（25）的16號位與第一維液相色譜柱（26）的輸入端相連，第一維液相色譜柱（26）的輸出端與十通閥（25）的19號位相連，十通閥（25）的20號位通過管線與八通閥（11）的9號位相連，八通閥（11）的10號位與第二維液相色譜柱1（12）的輸入端相連，第二維液相色譜柱1（12）的輸出端與六通閥（34）的28號位相連，六通閥（34）的33號位與檢測器相連；液相色譜泵2（14）與八通閥（11）的5號位相連，八通閥（11）的6號位和7號位通過管線相連，8號位與第二維液相色譜柱2（13）的輸入端相連，第二維液相色譜柱2（13）的輸出端與六通閥（34）的32號位相連，六通閥（34）的30號位與31號位通過管線相連，29號位接入廢液；

在該位置，自動進樣器（2）將酰基輔酶A提取液進樣到第一維液相色譜柱（26），短鏈?；o酶A首先流出并轉(zhuǎn)移至第二維液相色譜柱1（12）中；

待C6:0-酰基輔酶A從第一維液相色譜柱（26）完全流出后，控制十通閥（25）切換，十通閥（25）的15號位與24號位相連，十通閥（25）的24號位通過管線與21號位相連，十通閥（25）的22號位和23號位堵死；在該位置實現(xiàn)短鏈酰基輔酶A在第二維液相色譜柱1（12）中的分離以及第二維液相色譜柱2（13）的平衡；

待短鏈?；o酶A在第二維液相色譜柱1（12）中分離完成后，控制十通閥（25）、八通閥（11）、和六通閥（34）同時切換，在該位置，第一維液相色譜柱（26）中的中鏈和長鏈?；o酶A餾分轉(zhuǎn)移到第二維液相色譜柱2（13）中并進行分離；與此同時，完成第二維液相色譜柱1（12）的平衡；

待中鏈和長鏈?；o酶A分離完成后，控制十通閥（25）切換；稀釋液泵（27）與十通閥（25）的17號位相連，十通閥（25）的16號位與第一維液相色譜柱（26）的輸入端相連，第一維液相色譜柱（26）的輸出端與十通閥（25）的19號位相連，十通閥（25）的18號位接入廢液；在該位置，實現(xiàn)第一維液相色譜柱（26）中殘留溶劑的替換。