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[發明專利]一種陰道炎多聯檢測試劑盒及其制備方法在審

專利信息
申請號: 201710728491.5 申請日: 2017-08-23
公開(公告)號: CN107389940A 公開(公告)日: 2017-11-24
發明(設計)人: 楊致亭;王鴻鑫;劉根賢;房克爽;楊明霞 申請(專利權)人: 濰坊市康華生物技術有限公司
主分類號: G01N33/577 分類號: G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558
代理公司: 濰坊正信致遠知識產權代理有限公司37255 代理人: 王偉霞
地址: 261023 山東*** 國省代碼: 山東;37
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 陰道炎 聯檢 測試 及其 制備 方法
【權利要求書】:

1.一種陰道炎多聯檢測試劑盒,包括盒體,所述盒體內設有檢測卡和樣本處理液瓶;所述檢測卡包括卡蓋和卡體,其特征在于:所述卡體內設有陰道加德納菌檢測試紙條、白色念珠菌檢測試紙條和陰道毛滴蟲檢測試紙條,所述陰道加德納菌檢測試紙條、所述白色念珠菌檢測試紙條及所述陰道毛滴蟲檢測試紙條均設有第一樣品墊層和經過樣品墊預處理液處理的第二樣品墊層。

2.根據權利要求1所述的一種陰道炎多聯檢測試劑盒,其特征在于:所述樣本處理液瓶內的處理溶液為牛血清白蛋白、乙二胺四乙酸、疊氮鈉和15-25mM的磷酸鹽緩沖液配制而成的pH7.2-7.5處理溶液,且每100mL處理溶液中包含0.5~1%w/v的牛血清白蛋白10~15mL、1.0~2.0%w/v的乙二胺四乙酸3~5mL和0.03~0.05%w/v的疊氮鈉1~3mL。

3.根據權利要求1所述的一種陰道炎多聯檢測試劑盒,其特征在于:所述樣品墊預處理液為聚乙烯吡咯烷酮、酪蛋白、海藻糖、曲拉通X-100和15-25mM的Tris緩沖液配制的pH8-8.2的預處理液,且每1000mL預處理液中包含10~20g的聚乙烯吡咯烷酮、0.5~1%w/v的酪蛋白40~50mL、5~8%w/v的海藻糖10~15mL和0.3~0.5%w/v的曲拉通X-1001~2mL。

4.根據權利要求1所述的一種陰道炎多聯檢測試劑盒,其特征在于:所述陰道加德納菌檢測試紙條、所述白色念珠菌檢測試紙條及所述陰道毛滴蟲檢測試紙條的膠體金層分別涂布有抗陰道加德納菌單克隆抗體層、抗白色念珠菌單克隆抗體層及抗陰道毛滴蟲單克隆抗體層。

5.根據權利要求1所述的一種陰道炎多聯檢測試劑盒,其特征在于:所述陰道加德納菌檢測試紙條、所述白色念珠菌檢測試紙條及所述陰道毛滴蟲檢測試紙條的硝酸纖維素膜上均設有檢測線和質控線,相應檢測試紙條的硝酸纖維素膜上的檢測線分別為涂布有抗陰道加德納菌單克隆抗體層、抗白色念珠菌單克隆抗體層及抗陰道毛滴蟲單克隆抗體的檢測線,相應檢測試紙條的硝酸纖維素膜上的質控線為分別涂布有羊抗鼠IgG抗體層的質控線。

6.根據權利要求1所述的一種陰道炎多聯檢測試劑盒,其特征在于:所述卡體的內部設有陰道加德納菌檢測試紙條限位板、白色念珠菌檢測試紙條限位板和陰道毛滴蟲檢測試紙條限位板,所述限位板上設有試紙條放置標識,所述限位板的兩端分別設有固定擋板,所述固定擋板分別位于所述限位板兩側。

7.根據權利要求1所述的一種陰道炎多聯檢測試劑盒,其特征在于:所述卡蓋與所述陰道加德納菌檢測試紙條、所述白色念珠菌檢測試紙條及所述陰道毛滴蟲檢測試紙條相對應的區域分別設有樣本加樣孔、觀測孔和安裝標識孔。

8.一種陰道炎多聯檢測試劑盒的制備方法,其特征在于所述制備方法包括以下步驟:

(1)樣本處理液的配制

將0.5~1%w/v的牛血清白蛋白10~15mL、1.0~2.0%w/v的乙二胺四乙酸3~5mL和0.03~0.05%w/v的疊氮鈉1~3mL,用15-25mM磷酸鹽緩沖液定容至100mL,調pH值為7.2~7.5,分別裝入試劑瓶內,得到樣品處理液;

(2)樣品墊預處理液的配制

將10~20g的聚乙烯吡咯烷酮,0.5~1%w/v的酪蛋白40~50mL,5~8%w/v的海藻糖10~15mL和0.3~0.5%w/v的曲拉通X-1001~2mL用15-25mMTris定容至1L,調pH值為8.0~8.2;

(3)樣品墊預處理

將裁切好的玻璃纖維浸泡于所述步驟(2)的樣品墊預處理液中,靜置5~8分鐘取出,經過干燥處理后封存備用;

(4)膠體金墊的制備

4.1抗陰道加德納菌單克隆抗體膠體金墊的制備

將100mL制得的膠體金,調節pH至8.0~8.5,加入抗陰道加德納菌單克隆抗體,攪拌10~15min后,加入5~8%w/v的BSA 5~8mL,離心復溶后固相于玻璃纖維,干燥備用;

4.2抗白色念珠菌單克隆抗體膠體金墊的制備

將100mL制得的膠體金,調節pH至8.0~8.5,加入抗白色念珠菌單克隆抗體,攪拌10~15min后,加入5~8%w/v的BSA 5~8mL,離心復溶后固相于玻璃纖維,干燥備用;

4.3抗陰道毛滴蟲單克隆抗體膠體金墊的制備

將100mL制得的膠體金,調節pH至8.0~8.5,加入抗陰道毛滴蟲單克隆抗體,攪拌10~15min后,加入5~8%w/v的BSA 5~8mL,離心復溶后固相于玻璃纖維,干燥備用;

(5)包被硝酸纖維素膜

5.1分別包被抗陰道加德納菌單克隆抗體、抗白色念珠菌單克隆抗體和抗陰道毛滴蟲單克隆抗體

用pH8.0~8.2的PBS緩沖液分別將抗陰道加德納菌單克隆抗體稀釋至0.2~0.3mg/mL,抗白色念珠菌單克隆抗體稀釋至0.4~0.5mg/mL,抗陰道毛滴蟲單克隆抗體稀釋至0.3~0.4mg/mL,并分別噴于相應的硝酸纖維素膜上,形成抗陰道加德納菌單克隆抗體檢測線、抗白色念珠菌單克隆抗體檢測線和抗陰道毛滴蟲單克隆抗體檢測線;

5.4包被羊抗鼠IgG抗體

用pH8.0~8.2的PBS緩沖液將羊抗鼠IgG抗體稀釋至1.4~1.6mg/mL,分別噴于所述步驟5.1相應的硝酸纖維素膜上,形成羊抗鼠IgG抗體質控線;

5.5將上述步驟5.4制得的硝酸纖維素膜置37℃烘箱中干燥1.5~2小時;

(6)檢測卡安裝好,將所述步驟(1)中樣本處理液和安裝好的檢測卡分別置于盒體內,得到陰道炎多聯檢測試劑盒。

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