本發明公開了一株高產內毒素蛋白的銅綠假單胞菌，屬于微生物菌株及其應用領域。所述的銅綠假單胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)，PA?393，已于2015年08月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC NO.11267。本發明篩選得到的銅綠假單胞菌PA?393，在內毒素蛋白生產培養基中發酵22h，能產生大量的內毒素蛋白，蛋白含量約占內毒素總量的52.3％，遠遠高于其它標準菌株和臨床篩選菌株(P＜0.05)。解決了目前用于制備銅綠假單胞菌內毒素蛋白的菌株，內毒素蛋白含量較低，以及蛋白中雜質較多而引起的內毒素蛋白免疫效果降低、機體不良反應的問題。本發明的銅綠假單胞菌PA?393可以作為內毒素蛋白制備的生產菌株，應用于防御銅綠假單胞菌感染的免疫領域。

技術領域

本發明屬于微生物菌株及其應用領域，具體涉及一株高產內毒素蛋白的銅綠假單胞菌及其應用。

背景技術

銅綠假單胞菌(Pseudomonas Aeruginosa，PA)又稱綠膿桿菌，屬假單胞菌屬，廣泛分布于自然界及正常人的皮膚、呼吸道和腸道，是臨床上常見的條件致病菌，當機體免疫功能受損或缺損時，可引起嚴重的甚至致死性的感染。患代謝性疾病、血液病和惡性腫瘤的患者以及術后或某些治療后的患者易感染此菌，可引起術后傷口感染、褥瘡、膿腫、化膿性中耳炎等。銅綠假單胞菌引起的感染病灶可導致血行傳播而發生菌血癥和敗血癥，燒傷后感染了綠膿桿菌可造成死亡。銅綠假單胞菌已成為醫院內感染的重要病原菌之一，亦是戰傷感染的常見致病菌。銅綠假單胞菌還可引起禽畜敗血性死亡等，對人體健康和養殖業造成了較大的危害和經濟損失。

內毒素蛋白(Endotoxin Protein，EP)是銅綠假單胞菌的主要免疫源性物質，在該菌自溶時釋放到培養液里，因此包含于銅綠假單胞菌培養液上清里。內毒素蛋白可刺激機體產生體液性抗體、具有激發機體網狀內皮系統細胞的活力和增強巨噬細胞吞噬功能的作用；同時，內毒素蛋白還具有毒性低和發熱性弱的特點,對防治銅綠假單胞菌的感染是非常有效的。然而目前已有的用于制備銅綠假單胞菌內毒素蛋白的菌株，其產內毒素蛋白的含量較低，雜質較多，而過多的雜質又會降低內毒素蛋白的免疫效果，還會引起機體的不良反應。因此，篩選到具有高產內毒素蛋白特性的銅綠假單胞菌是十分有意義的。

發明內容

本發明的目的是提供一株可用于制備內毒素蛋白的銅綠假單胞菌(PseudomonasAeruginosa)PA-393菌株，所述銅綠假單胞菌PA-393菌株篩選自哈爾濱醫科大學附屬第二醫院。

本發明提供的銅綠假單胞菌PA-393菌株已于2015年08月24日保藏于位于北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為：CGMCC NO.11267。

本發明所述的銅綠假單胞菌PA-393菌株具有下述性質：

1.菌落形態：血液瓊脂平板培養基上37℃培養18～24h，肉眼觀察，菌落為光滑微隆起、邊緣整齊、灰色、表面濕潤、不透明、直徑約1.5～2.5mm；鏡檢為革蘭氏陰性短桿狀。

2.培養特性：血液瓊脂平板培養基上37℃培養18～24h，有溶血圈出現；內毒素蛋白生產培養基中37℃培養18～24h，產綠色色素，培養基均勻混濁，呈黃綠色。

3.生理生化特征：氧化酶實驗陽性，MR試驗和VP試驗陰性，甘露醇試驗陰性，能分解葡萄糖產酸不產氣，能液化明膠和利用枸櫞酸鹽，不產硫化氫。而且，所述銅綠假單胞菌PA-393菌株在內毒素蛋白生產培養基中37℃發酵22h，能產生大量的內毒素蛋白，蛋白含量約占內毒素總量的52.3％。

本發明的有益效果

1.本發明提供了一株銅綠假單胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)PA-393菌株，該菌株可高產內毒素蛋白，其中蛋白質含量約為52.3％，遠遠高于其它標準菌株和臨床篩選菌株(P＜0.05)。