[發明專利]一種克服百合種間雜交障礙的雜交方法在審
| 申請號: | 201710429399.9 | 申請日: | 2017-06-08 |
| 公開(公告)號: | CN107094615A | 公開(公告)日: | 2017-08-29 |
| 發明(設計)人: | 張克中;崔金騰;邵楊 | 申請(專利權)人: | 北京農學院 |
| 主分類號: | A01H1/02 | 分類號: | A01H1/02;A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京國坤專利代理事務所(普通合伙)11491 | 代理人: | 姜彥 |
| 地址: | 102206 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 克服 百合 間雜 障礙 雜交 方法 | ||
1.一種克服百合種間雜交障礙的雜交方法,其特征在于:包括以下步驟:1)、花粉前期處理;
2)、人工自交授粉;
3)、切花柱和嫁接花柱;
4)、種子的處理;
5)、切種子接種法;
6)、繼代培養;
7)、誘導生根培養;
8)、營養生長培養;
9)、出瓶移栽。
2.如權利要求1所述的一種克服百合種間雜交障礙的雜交方法,其特征在于:1)、花粉前期處理:用小刀和鑷子,將成熟花粉剝下,放入事先裁好的草圖紙內,折好后放入裝有氯化鈣粉末的瓶中進行干燥,選取處理好的新鮮花粉進行雜交;2)、人工自交授粉:取將要開放的百合,撥開花瓣,去除未成熟的花藥,將百合花朵用雜交袋罩好,使去掉花藥的百合花朵完全隔離外界花粉;去掉花藥后,當花柱上產生明顯柱頭分泌物時,將處理好的花粉均勻、大量的涂抹在花柱上,使花粉覆蓋柱頭面積不少于柱頭總面積的2/3;并將花朵罩上雜交袋,在袋外用標簽系好并標注百合品種名稱及人工自交的日期。
3.如權利要求1所述的一種克服百合種間雜交障礙的雜交方法,其特征在于:3)、切花柱和嫁接花柱:在人工自交授粉1~2天后,以45度角切下人工自交授粉百合花柱總體長度的1/3,同時將要嫁接的母本百合花柱也以45度角切下總體長度的1/3;將切下的人工自交授粉的百合花柱嫁接到剩余2/3的母本的花柱上;關鍵要使雙方的花柱壁對齊,如果不能兩邊對齊,就保持一側花柱壁對齊;再用寬1cm、長8-10cm的塑料條將接口捆扎起來,捆扎時要將傷口全部包嚴,并捆緊;在溫室中培養,白天控溫在24-26℃,夜間控溫在20-22℃;相對濕度85~95%,不通風全遮光,5~6天后受精過程完成,按照常規田間種植方法管理。
4.如權利要求1所述的一種克服百合種間雜交障礙的雜交方法,其特征在于:4)、種子的處理:待果實成熟后,取飽滿果實,在相對無菌的環境下按果實腹縫線與背縫線,用解剖刀將其劃開;取出合子胚,在光線較好的地點仔細觀察胚,選取有胚的種子;將有胚的種子,放入超凈工作臺中,使用蒸餾水洗凈種子,然后采用0.1~0.2%HgCl,消毒20~30s,無菌水沖洗3~4次。
5.如權利要求1所述的一種克服百合種間雜交障礙的雜交方法,其特征在于:5)、切種子接種法:在超凈工作臺中,沿著種子的直邊一側(非弧形邊),在不切到胚的情況下,用解剖刀切掉0.4~0.5mm邊條,含有胚珠部分平躺著接種在MS+6-BA(1~2mg/L)+NAA(0.5~1mg/L)、蔗糖30~40g/L、瓊脂6~7g/L的MS培養基中進行胚搶救,培養基pH值調到5.8~6.4的范圍內,在培養環境溫度為20~30℃,光照強度為2000~3000lx,光照時間7~8個小時的培養間進行培養;調節PH值的試劑為:1mol/L磷酸,1mol/L氫氧化鈉,以下調節PH值是均與此相同。
6.如權利要求1所述的一種克服百合種間雜交障礙的雜交方法,其特征在于:6)、繼代培養:在超凈工作臺中,將長出葉片的百合材料在超凈工作臺上進行切割,取大小合適的葉子放到含有0.2~0.6mg/L KT、0.5~1.5mg/L 2,4-D、蔗糖30~40g/L、瓊脂6~7g/L的MS培養基中進行繼代培養,45~55天繼代一次,共繼代2~3次,培養基為pH值5.8~6.4,在培養環境溫度在20~30℃,光照強度為2000~3000lx,光照時間7~8個小時的培養間進行培養。
7.如權利要求1所述的一種克服百合種間雜交障礙的雜交方法,其特征在于:7)、誘導生根培養:在超凈工作臺中,將繼代培養后并長出葉子的百合材料接種到含有1~2mg/L NAA、0.4~0.75mg/L BA、蔗糖30~40g/L、瓊脂6~7g/L的MS的生根培養基上,培養基為pH值5.8~6.4,在培養環境溫度在20~30℃,光照強度為2000~3000lx,光照時間7~8個小時的培養間進行培養,培養25~35天出根。
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