技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別是一種適用于對纖細裸藻進行培養的方法。

背景技術

纖細裸藻屬于裸藻門裸藻屬，細胞多為紡錘形，少數為圓柱形，無細胞壁，表質軟，形狀易變，直徑50μm，是地球上最早的生命之一，出現在5多億年前，基因始終沒有變化，是一種高效的光合植物，以光合自養生長繁殖，同時又可以進行化能異養。纖細裸藻由于具有富含豐富的營養物質，并且具有可進行化能異養培養的培養模式所具有的得天獨厚的優勢，因此是一種兼具營養價值與工業化潛能的藻種。

纖細裸藻的主要培養方式有自養、混養和異養。目前規模化培養多采用自養，但自養存在培養密度低、生長周期長、生產效率低、占地面積大、采收困難等不利影響。而采用廉價、適宜和廣泛使用的有機碳源葡萄糖為唯一碳源的培養條件下，纖細裸藻的異養培養不受光照、溫度等環境和氣候條件影響，生長速率快，培養密度高，生產過程容易控制，產率可大幅提高。

目前已有的異養培養方式主要為分批培養、流加分批培養和間歇式補料分批培養。其中分批培養是最普遍采用的培養方式。但分批培養存在培養過程中延滯期較長，培養達到穩定期后藻細胞老化生長減緩，以及培養末期葡萄糖濃度較高造成浪費的問題，使培養產率降低。

發明內容

本發明的目的是提供一種培養周期短、高產率、碳源利用率高的纖細裸藻的培養方法。

本發明的技術方案是，

一種纖細裸藻的培養方法，其步驟包括：對纖細裸藻進行異養培養，在指數生長期中期，放料部分纖細裸藻，再補充部分營養物和水，繼續培養。

在指數生長中期，每天進行“放料纖細裸藻，纖細裸藻的選取量為1/2（占培養液體積的50%），再補充營養物和水，營養物和水的選取量為1/2（占培養液體積的50%），繼續培養”的操作一次，直到培養周期結束。

所述異養培養液的組成包括：葡萄糖 20g/L，酵母粉5g/L，K₂HPO₃ 0.3g/L，KH₂PO₃0.2g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1g/L， TE微量元素液1mL/L，其余為水，其中TE微量元素液組成包括 H₃BO₃ 2.81g/L、MnCl ₂·4H₂O 1.82g/L、ZnSO₄·7H₂O 0.23g/L、Na₂MoO₄·2H₂O 0.34g/L、CuSO₄·5H₂O 0.05g/L 以及Co(NO₃) ₂·6H₂O 0.06g/L。

所述異養培養液pH值在3.0~6.0。

所述補充營養物的組成包括每 1000mL 培養液中添加葡萄糖 4-5g，酵母粉4-5g/L，K₂HPO₃ 0.05g，KH₂PO₃ 0.01g，MgSO₄·7H₂O 0.02g， TE 微量元素液 0.5mL。

所述異養培養過程中纖細裸藻的接種量為培養液 10％的體積占比。

所述異養培養過程中培養溫度25-28℃，通空氣量1.0L/min，加入0.05％的有機硅消泡劑。

所述指數生長期中期為自接種培養的第三天至第四天。

優選的，每次放料1/2（占總培養體積的1/2）的纖細裸藻。

本發明的有益效果是能夠快速、高產的培養出利用率高的纖細裸藻，極大的降低了纖細裸藻的生產成本。

附圖說明

圖1是本發明的通氣自養與異養生長曲線示意圖，

圖2是本發明的對數期補料生長曲線示意圖。

具體實施方式：

結合以上附圖詳細描述實施例，

實施例 1

通氣自養培養：