技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及RGMB基因在結(jié)腸腺癌的診斷、治療中的用途。

背景技術(shù)

結(jié)腸腺癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，近年來，其發(fā)病率逐漸升高，占所有惡性腫瘤的第二位。

結(jié)腸腺癌的發(fā)生，發(fā)展是一個涉及多基因改變的復(fù)雜過程。其發(fā)病過程與細(xì)胞分裂、分化、基因群的時空表達(dá)異常及其蛋白質(zhì)的相互作用有關(guān)。鑒定與結(jié)腸腺癌發(fā)病相關(guān)的癌基因或抑癌基因，對研究結(jié)腸腺癌癌變機(jī)理及其診斷、治療和預(yù)防具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一在于提供一種通過檢測RGMB基因或蛋白表達(dá)差異來診斷結(jié)腸腺癌的方法。

本發(fā)明的目的之二在于提供一種通過檢測RGMB基因或蛋白表達(dá)差異來預(yù)測結(jié)腸腺癌預(yù)后的方法。

本發(fā)明的目的之三在于提供一種通過抑制RGMB基因或RGMB蛋白來治療結(jié)腸腺癌的方法。

本發(fā)明的目的之四在于提供一種用于篩選治療結(jié)腸腺癌的藥物的方法。

本發(fā)明的目的之五在于提供一種用于治療結(jié)腸腺癌的藥物。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了檢測RGMB基因或RGMB蛋白的產(chǎn)品在制備結(jié)腸腺癌診斷工具中的用途。

本發(fā)明還提供了檢測RGMB基因或RGMB蛋白的產(chǎn)品在制備預(yù)測結(jié)腸腺癌預(yù)后工具中的用途。

進(jìn)一步，所述檢測RGMB基因或RGMB蛋白的產(chǎn)品包括檢測RGMB基因或RGMB蛋白的表達(dá)水平的產(chǎn)品。所述產(chǎn)品包括能夠結(jié)合RGMB基因的核酸或者能夠結(jié)合RGMB蛋白的物質(zhì)(例如抗體)。所述核酸能夠檢測RGMB基因的表達(dá)水平；所述物質(zhì)能夠檢測RGMB蛋白的表達(dá)水平。

本發(fā)明的檢測RGMB基因的產(chǎn)品可基于使用核酸分子的已知方法來發(fā)揮其功能：如PCR、如Southern雜交、Northern雜交、點(diǎn)雜交、熒光原位雜交(FISH)、DNA微陣列、ASO法、高通量測序平臺等。使用該產(chǎn)品可以定性地、定量地、或半定量地實(shí)施分析。

包含在上述產(chǎn)品中的核酸可以通過化學(xué)合成來獲得，或通過從生物材料制備含有期望核酸的基因，然后使用設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增期望核酸的引物擴(kuò)增它來獲得。

進(jìn)一步，所述PCR方法為已知方法，例如，ARMS(Amplification Refractory Mutation System，擴(kuò)增不應(yīng)突變系統(tǒng))法、RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。擴(kuò)增的核酸可以通過使用點(diǎn)印跡雜交法、表面等離子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特異性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可擴(kuò)增片段長度多態(tài)性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(單鏈構(gòu)象多態(tài)性)法來檢測。

上面所述的核酸包括擴(kuò)增RGMB基因的引物，產(chǎn)品中包括的引物可以通過通過化學(xué)合成來制備，通過使用本領(lǐng)域技術(shù)人員知道的方法參考已知信息來適當(dāng)?shù)卦O(shè)計(jì)，并通過化學(xué)合成來制備。

在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，所述核酸為QPCR實(shí)驗(yàn)中使用的擴(kuò)增引物，所述引物的序列如SEQ ID NO.1(正向序列)和SEQ ID NO.2(反向序列)所示。

上面所述的核酸還可包括探針，所述探針可以通過化學(xué)合成來制備，通過使用本領(lǐng)域技術(shù)人員知道的方法參考已知信息來恰當(dāng)設(shè)計(jì)，并通過化學(xué)合成來制備，或者可以通過從生物材料制備含有期望核酸序列的基因，并使用設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增期望核酸序列的引物擴(kuò)增它來制備。

本發(fā)明的檢測RGMB蛋白的產(chǎn)品可基于使用抗體的已知方法來發(fā)揮其功能：例如，可以包括ELISA、放射免疫測定法、免疫組織化學(xué)法、Western印跡等。

本發(fā)明的檢測RGMB蛋白的產(chǎn)品包括特異性結(jié)合RGMB蛋白的抗體或其片段。可以使用任何結(jié)構(gòu)、尺寸、免疫球蛋白類別、起源等的抗體或其片段，只要它結(jié)合靶蛋白質(zhì)即可。本發(fā)明的檢測產(chǎn)品中包括的抗體或其片段可以是單克隆的或多克隆的。抗體片段指保留抗體對抗原的結(jié)合活性的抗體一部分(部分片段)或含有抗體一部分的肽。抗體片段可以包括F(ab′)₂、Fab′、Fab、單鏈Fv(scFv)、二硫化物鍵合的Fv(dsFv)或其聚合物、二聚化V區(qū)(雙抗體)、或含有CDR的肽。本發(fā)明的檢測RGMB蛋白的產(chǎn)品可以包括編碼抗體或編碼抗體片段的氨基酸序列的分離的核酸，包含該核酸的載體，和攜帶該載體的細(xì)胞。