[發(fā)明專(zhuān)利]非糖基化蛋白質(zhì)的純化在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710044891.4 | 申請(qǐng)日： | 2009-01-15 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN107033233A | 公開(kāi)（公告）日： | 2017-08-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | R·法爾肯施泰因;B·魏丹茲;C·吉賽爾;S·格賴塔納;A·格羅斯曼;F·赫西;B·克雷默;M·蓬皮阿蒂;A·肖布馬爾;N·菲爾勒 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 弗·哈夫曼-拉羅切有限公司 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C07K14/56 | 分類(lèi)號(hào)： | C07K14/56;C07K1/18 |
| 代理公司： | 北京市中咨律師事務(wù)所11247 | 代理人： | 柴云峰,黃革生 |
| 地址： | 瑞士*** | 國(guó)省代碼： | 暫無(wú)信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 非糖基化 蛋白質(zhì) 純化 | ||
1.用于純化已經(jīng)在原核細(xì)胞中重組產(chǎn)生的IFNα-2a的方法，其特征在于所述方法包括以下順序的以下步驟：a)疏水作用層析,b)陰離子交換層析,c)陽(yáng)離子交換層析。
2.權(quán)利要求1的方法，其特征在于所述方法由以下順序的以下步驟組成：a)疏水作用層析,b)陰離子交換層析,c)陽(yáng)離子交換層析。
3.權(quán)利要求1的方法，其特征在于所述方法包括以下順序的以下步驟作為僅有的層析步驟：a)疏水作用層析,b)陰離子交換層析,c)陽(yáng)離子交換層析。
4.權(quán)利要求1的方法，其特征在于所述原核細(xì)胞是大腸桿菌細(xì)胞。
5.前述權(quán)利要求任何一項(xiàng)的方法，其特征在于所述方法在步驟c)后包括額外的步驟，其為d)聚乙二醇化所述多肽。
6.在原核細(xì)胞中重組產(chǎn)生IFNα-2a的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：
a)在適合于表達(dá)所述IFNα-2a的條件下培養(yǎng)包含編碼所述IFNα-2a的核酸的原核細(xì)胞，
b)從培養(yǎng)基或原核細(xì)胞中回收所述IFNα-2a，
c)利用權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的方法純化所述IFNα-2a。
7.用于通過(guò)包含體在原核細(xì)胞中重組產(chǎn)生IFNα-2a的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：
a)在適合于表達(dá)所述IFNα-2a并形成含有所述IFNα-2a的包含體的條件下培養(yǎng)包含編碼所述IFNα-2a的核酸的所述原核細(xì)胞，
b)從所述原核細(xì)胞中回收所述包含體，
c)從所述包含體中溶解并復(fù)性所述IFNα-2a，
d)通過(guò)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的方法純化所述IFNα-2a。
8.前述權(quán)利要求任何一項(xiàng)的方法，其特征在于在第三個(gè)層析步驟后獲得的多肽溶液中內(nèi)毒素、和/或大腸桿菌DNA、和/或大腸桿菌細(xì)胞蛋白質(zhì)的含量與第一個(gè)層析步驟之前的含量相比降低了。
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