本公開描述了用于在自然殺傷(NK)細胞中表達的嵌合抗原受體，包括經修飾以表達嵌合抗原受體的NK細胞(和/或iPSC)的藥物組合物，以及涉及這些嵌合抗原受體的方法。通常，所述嵌合抗原受體包括包含抗原識別區的胞外結構域、與該胞外結構域連接的跨膜結構域，以及與該跨膜結構域連接的胞內結構域。所述胞內結構域可包括激活NK細胞的信號傳導肽。

相關申請的交叉引用

本申請要求2015年1月29日提交的美國臨時專利申請62/109,281的的優先權，通過引用將其并入本文。

發明內容

在一個方面，本公開描述了用于在自然殺傷(NK)細胞中表達的嵌合抗原受體。通常，所述嵌合抗原受體包括包含抗原識別區的胞外結構域、連接至所述胞外結構域的跨膜結構域，以及連接至所述跨膜結構域的胞內結構域。所述胞內結構域可包含激活NK細胞的信號傳導肽(signaling peptide)。

在一些實施方式中，所述抗原識別結構域可特異性地結合與疾病相關的抗原。

在一些實施方式中，所述抗原識別結構域可特異性地結合腫瘤抗原。

在一些實施方式中，所述胞外結構域還可包括信號肽(signal peptide)或前導序列(leader sequence)和/或間隔序列(spacer)。

在一些實施方式中，所述胞內結構域可包括諸如2B4、DAP10、DAP12、IL21R、CD137(41BB)或CD3ζ的NK細胞膜結合信號接頭蛋白(NK cell membrane-bound signalingadaptor protein)的信號傳導結構域(signaling domain)。

在一些實施方式中，所述跨膜結構域可包括諸如CD16、NKp44、NKp46或NKG2D的在NK細胞中表達的自然細胞毒性受體(natural cytotoxicity receptor)的跨膜區。

在另一方面，本公開描述了包括被修飾以便表達上文總結的嵌合抗原受體的任何實施方式的NK細胞(和/或iPSC)的藥物組合物。

在另一方面，本公開描述了向有病況(condition)的受試者提供免疫治療的方法。通常，該方法包括將上文總結的治療性組合物施用于該受試者，其中所述嵌合抗原受體的抗原識別區特異性地結合與該病況相關的抗原。

以上的總結無意描述本發明的每個公開的實施方式或者每種實踐。以下的說明書更具體地例舉了闡釋性實施方式。在該申請的若干處，通過列出實施例來提供指導，這些實施例可以以各種組合使用。每種情形下，所給出的列表僅用作代表性組，而不應解釋為排他性列表。

附圖簡要說明

圖1.(A)示例性自然細胞毒性受體以及這些受體與它們配體的結合對NK細胞脫顆粒和極化以及靶細胞殺傷的影響。(B)自然細胞毒性受體的代表性實例和它們相應的信號接頭。(C)用在iPSC衍生的NK細胞中的第三代嵌合T細胞抗原受體構建體。

圖2.(A)NK激活CAR(NK-activating CAR)的一般化示意圖。(B)新型嵌合抗原受體構建體的示意圖。將嵌合抗原受體克隆進pkt2載體，該載體含有與SB100X轉座酶一起使用的IR/DR、mCAGs啟動子、嵌合抗原受體(CAR)序列、內部核糖體進入位點(IRES)，以及GFP:Zeo選擇標記。嵌合抗原受體片段從UniProt獲得，并通過gBlock合成和傳統限制酶克隆(IDT)進行組裝。