本發(fā)明公開了能夠檢測抗水痘帶狀皰疹病毒抗體、尤其是抗水痘帶狀皰疹病毒中和抗體的水痘帶狀皰疹病毒gE糖蛋白抗原，還公開了該抗原在制備檢測抗水痘帶狀皰疹病毒中和抗體的檢測試劑中的用途以及相應(yīng)的檢測試劑盒。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗體的免疫檢測領(lǐng)域，特別是抗水痘帶狀皰疹病毒抗體、尤其是中和抗體的免疫檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)

水痘是由水痘帶狀皰疹病毒(varicella-zoster virus， VZV)原發(fā)感染引起的疾病。水痘屬于高傳染性疾病，在世界范圍流行性傳播。水痘的易感人群主要是兒童，其特征為全身性皰疹并常伴有發(fā)熱癥狀。對于絕大多數(shù)具有正常免疫能力的兒童而言，水痘屬于一種良性的自限性疾病；但是對于因各種原因?qū)е旅庖吖δ艿拖碌娜巳海琕ZV感染可能引起嚴重的、甚至是致命的疾病。研究表明，自然感染或免疫接種水痘減毒活疫苗后，機體可以再次被水痘病毒感染或激活而不產(chǎn)生任何臨床癥狀，臨床上二次感染水痘較罕見。

VZV屬皰疹病毒科皰疹病毒亞科，為雙鏈DNA病毒。VZV呈現(xiàn)為典型的脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)。基因組為線性雙鏈DNA分子，由大約124884個堿基對組成，分子量為(80±3)×106道爾頓。該病毒基因組由71個開放讀碼框(ORF)組成，編碼約69種蛋白質(zhì)。基因產(chǎn)物按立即早期基因(IE)、早期基因(E)、晚期基因(L)順序進行表達。L基因編碼一些結(jié)構(gòu)蛋白，如衣殼蛋白及糖蛋白。VZV病毒基因至少編碼9種糖蛋白：gE、gB、gH、gI、gC、gL、gK、gM、gN，他們主要存在于病毒囊膜和感染細胞的細胞膜中，與病毒的致病性和免疫原性有著密切關(guān)系。

國內(nèi)關(guān)于水痘方面的研究往往限于疫苗的研制和開發(fā)，而缺乏大范圍人群正式使用后的評估。只有從病人及人群進行研究才能更好地對疫苗免疫效果進行評估，并且經(jīng)臨床試驗證明有效的疫苗應(yīng)繼續(xù)進行上市后大規(guī)模人群應(yīng)用后的研究，這樣能得到真實的保護效果狀況。隨著接種水痘疫苗人數(shù)的增加，現(xiàn)在迫切需要一種快速、簡便同時具有高靈敏度、高特異性優(yōu)點的檢測抗VZV抗體的方法，以此來判斷接種疫苗后個體對VZV的敏感度以及對疫苗的免疫應(yīng)答狀況。目前檢測VZV抗體的方法主要有酶聯(lián)免疫吸附測定(enzymelinked immunosorbent assay，ELISA)、兔抗糖蛋白抗體ELISA(gpELISA)、膜抗原熒光抗體測定(fluorescent antibody to membrane antigen assay，F(xiàn)AMA)、間接熒光抗體試驗(indirect fluorescent-antibody technique，IFAT)、補體結(jié)合試驗(CF)、免疫吸附血凝試驗((immune adherence hemagglutination assay，IAHA)、放射免疫法(radioimmunoassay，RIA)、中和試驗(ENT)、乳膠凝集試驗(LA)等，其中最常用的是FAMA和ELISA法。

FAMA法是目前進行血清中抗體檢測的金標準，是檢測人群VZV抗體水平最佳的方法，可以較準確的確定免疫效果，已經(jīng)成為評價其他方法的標準。FAMA法在VZV與其它皰疹病毒一起時，并不會出現(xiàn)交叉性反應(yīng)，特異性良好，特別是在血清中抗VZV血清抗體水平比較低時靈敏度也較高，很適合用于疫苗免疫后血清學(xué)的評價。但FAMA法存在一些缺點，例如反應(yīng)時間長，操作繁瑣，不能實現(xiàn)自動化、標準化、不宜檢測大批量樣本，這使FAMA法不適合大批量的檢測血清，無法廣泛使用。

由于ELISA操作簡單、快速，并且可進行大批量檢測，因此它是目前使用最為廣泛的方法。ELISA檢測特異性 IgG抗體水平應(yīng)用廣，ELISA間接法具有方法簡單、準確度高、無需特殊儀器等特點，通過包被純化的表位抗原，以WHO VZV血清抗體參考品為標準品，建立了定量檢測抗VZV中和抗體的 ELISA 方法。但目前市售的ELISA試劑盒采用的是全病毒抗原包被，因此敏感性較差。血清學(xué)方法檢測VZV抗體對于易感人群的確定和鑒別、水痘疫苗免疫策略的研究以及疫苗免疫效果的評價具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容