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[發明專利]一種羧甲基化五味子多糖及其制備方法和應用有效

專利信息
申請號: 201610313007.8 申請日: 2016-05-12
公開(公告)號: CN106632709B 公開(公告)日: 2019-05-31
發明(設計)人: 仰榴青;張漪靜;趙婷;李倩;胡琴漢;吳慧玉;吳向陽 申請(專利權)人: 江蘇大學
主分類號: C08B37/00 分類號: C08B37/00;A23L33/125
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 212013 江*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 甲基化 五味子 多糖 及其 制備 方法 應用
【權利要求書】:

1.一種羧甲基化五味子多糖,其特征在于:所述羧甲基化五味子多糖的分子量為1.698×104 Da,所述羧甲基化五味子多糖的單糖組成為:甘露糖、葡萄糖和半乳糖,摩爾比為1:44.84:3.71,所述羧甲基化五味子多糖的溶解度為12.24-12.76 mg/mL,所述羧甲基化五味子多糖在水溶液中呈聚集狀形成分子鏈,所述分子鏈的厚度為0.1-1 nm;

按照下述步驟進行:

(1)五味子粗多糖的制備:將新鮮五味子于55-65℃烘箱內干燥12-24h后進行粉碎,采用石油醚對干燥后的五味子進行回流脫脂2-3次,然后將脫脂后的五味子藥渣以料液比1:10-1:15加入蒸餾水進行水提,取2-3次得到五味子多糖提取液,五味子多糖提取液經減壓濃縮,采用80%的乙醇醇沉3-4次,得到的醇沉物經離心后,復溶、揮醇,經截留分子量為3000Da的透析袋透析12-36h,真空干燥2-3h得到五味子粗多糖;

(2)五味子多糖的羧甲基化:將五味子粗多糖溶于異丙醇溶液中,機械攪拌使其充分溶解,五味子粗多糖和異丙醇料液比為1:30 - 1:40(g/mL),溶解溫度為20-25℃,攪拌時間為15-20 min,攪拌速度為60-240 r/min,向溶解后的五味子多糖溶液中加入質量分數為15-20%的NaOH溶液進行堿化,NaOH溶液的加入量為異丙醇體積的20-30%,堿化溫度為20-25℃,堿化時間為1-2 h,然后在攪拌狀態下繼續向堿化后的五味子粗多糖反應液中加入氯乙酸進行羧甲基化,氯乙酸加入量為0.005-0.08 g/mL,水浴溫度為40-80℃,羧甲基化反應時間為1-8 h,待反應液冷卻后調節反應液pH至中性,采用乙醇醇沉,離心后得到醇沉產物,將醇沉產物采用少量蒸餾水復溶后進行透析,透析結束后進行真空干燥得到羧甲基化五味子粗多糖;

(3)純化:將步驟(2)得到的羧甲基化五味子粗多糖溶解于0.05-0.1mol/L 的NaCl溶液中,然后緩慢滴加至DEAE-52層析柱中,并采用0.05-0.2 mol/L的NaCl溶液進行梯度洗脫,繪制洗脫曲線,根據洗脫曲線分別收取合并洗脫液,得到羧甲基化五味子多糖不同組分,選取0.05mol/L NaCl的洗脫組分合并,經截留分子量為3000 Da的透析袋透析、真空干燥后,得到羧甲基化五味子多糖。

2.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖,其特征在于:所述步驟(1)中五味子粗多糖的得率為15.9-19.8%,多糖含量為54.4-65.7%,溶解度為0.08-0.12 mg/mL。

3.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖,其特征在于:所述步驟(2)中羧甲基化五味子粗多糖的得率為60.2-86.4%,羧甲基化取代度為0.41-0.71,溶解度為0.46-0.54mg/mL。

4.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖,其特征在于:所述步驟(1)中回流脫脂的溫度為70-80℃,脫脂時間為1-2 h,水提溫度為90-100℃,提取時間為4-6 h。

5.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖,其特征在于:所述步驟(2)中采用80%乙醇醇沉24-48h,醇沉液以4000-5000rpm轉速離心5-10 min。

6.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖,其特征在于:所述步驟(2)中采用經截留分子量為3000 Da的透析袋透析首先采用流水透析,最后進行蒸餾水透析,流水透析時間為36-48h,蒸餾水透析時間為24-36h。

7.根據權利要求1所述的羧甲基化五味子多糖,其特征在于:所述步驟(2)中真空干燥時間為2-3h,溫度為20-25℃,真空度為-0.085 - -0.1Mpa。

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