技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬藥物制藥領(lǐng)域，涉及硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)在制藥中的用途，具體涉及硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)在制備治療子宮內(nèi)膜異位癥及其粘連藥物中的用途。

背景技術(shù)

現(xiàn)有技術(shù)公開(kāi)了子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EMs)是育齡期婦女的常見(jiàn)疾病，其發(fā)病率在育齡婦女中高達(dá)10-15％，該疾患主要臨床表現(xiàn)為盆腔痛和不孕，嚴(yán)重影響了婦女的生活質(zhì)量。該病的發(fā)病機(jī)制至今尚未明確，臨床治療實(shí)踐面臨巨大的困難和挑戰(zhàn)，目前干預(yù)措施中所采取的手術(shù)去除病灶和抗雌激素藥物治療能在一定程度上改善病情、緩解癥狀，但仍難以避免再次復(fù)發(fā)；其中盆腹腔粘連是內(nèi)異癥最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，是造成患者疼痛、不孕等的常見(jiàn)原因，也是造成手術(shù)困難和手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)升高的重要原因。內(nèi)異癥及其粘連的形成機(jī)制目前尚不完全明確，業(yè)內(nèi)公認(rèn)的是炎癥反應(yīng)在疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。有研究顯示氣體信號(hào)分子硫化氫(hydrogen sulfide，H2S)在眾多病理生理狀態(tài)下發(fā)揮重要的作用，有研究表明H2S在心血管系統(tǒng)有抑制心肌炎癥、減輕氧化應(yīng)激、減少促纖維化因子、抑制膠原和心肌纖維化的作用。迄今，尚未見(jiàn)H2S在子宮內(nèi)膜異位癥模型中同樣發(fā)揮抗炎、抗纖維化的作用以及抑制病灶生長(zhǎng)和粘連形成的作用的報(bào)道。

目前眾多研究表明，子宮內(nèi)膜異位癥是一種炎性疾病。子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制中的炎性學(xué)說(shuō)認(rèn)為，內(nèi)異癥是腹腔微環(huán)境中各種免疫細(xì)胞與細(xì)胞因子功能失常引發(fā)的盆腔局部免疫反應(yīng)。有研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)異癥患者腹腔液中多種巨噬細(xì)胞趨化因子如MCP-1、RANTES含量顯著增高，IL-1、2、4、6、8等水平等均增高，且IL-6和IL-8含量隨病情嚴(yán)重程度而增加；與健康的婦女相比，子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔內(nèi)的數(shù)目和活性增加，而其分泌的一些與炎癥有關(guān)的因子如IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、MCP-1，MMP-9等也有明顯的上升；這些細(xì)胞因子通過(guò)自分泌或旁分泌發(fā)揮細(xì)胞間的通訊作用，對(duì)巨噬細(xì)胞、單 核細(xì)胞、白細(xì)胞等免疫細(xì)胞產(chǎn)生趨化作用，并與炎性細(xì)胞之間產(chǎn)生正反饋效應(yīng)，其中IL-1β是一個(gè)關(guān)鍵分子，它能刺激子宮內(nèi)膜細(xì)胞多種因子的表達(dá)，在細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移及組織重塑中發(fā)揮重要作用，對(duì)于子宮內(nèi)膜的種植極為重要；此外IL-1β還能誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜細(xì)胞表達(dá)環(huán)氧合酶-2(COX-2)，而COX-2又通過(guò)正反饋循環(huán)增加局部的前列腺素和雌激素，加重炎癥并促進(jìn)增殖。

現(xiàn)有技術(shù)還公開(kāi)了盆腹腔粘連是子宮內(nèi)膜異位癥最常見(jiàn)的表現(xiàn)之一，是造成內(nèi)異癥患者疼痛、不孕等的常見(jiàn)原因，也是造成手術(shù)困難和手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)升高的重要原因。

基于現(xiàn)有技術(shù)的現(xiàn)狀，本申請(qǐng)的發(fā)明人擬利用經(jīng)典的子宮角粘連模型研究探索硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)對(duì)粘連的影響，用低分子肝素鈉作為陽(yáng)性藥，以PAG作為抑制劑，提供硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)在制備治療子宮內(nèi)膜異位癥及其粘連藥物中的用途觀察硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)在經(jīng)典的子宮角粘連模型中是否同樣有抑制粘連的作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)在制藥中的新用途。尤其是硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)在制備治療子宮內(nèi)膜異位癥及其粘連藥物中的用途。

本發(fā)明采用外源型H2S供體(硫氫化鈉)，在子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞系、C57小鼠內(nèi)異癥模型、Wistar大鼠子宮角粘連模型中，進(jìn)行了H2S對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥及其粘連的作用實(shí)驗(yàn)，包括硫氫化鈉抗IL-1β誘導(dǎo)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)作用，以及硫化氫供體硫氫化鈉對(duì)子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞活力、凋亡、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)方面的影響等試驗(yàn)，以及用自體子宮縫合模型和異體子宮注射模型驗(yàn)證藥物對(duì)硫氫化鈉對(duì)內(nèi)異癥及其粘連的影響，以及使用熱板儀觀測(cè)小鼠的熱板痛閾時(shí)間等，結(jié)果顯示，所述的外源性H2S供體能有效的抑制IL-1β誘導(dǎo)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)；能明顯改善內(nèi)異癥模型小鼠的熱痛覺(jué)過(guò)敏，使病灶縮小，減輕纖維化和能抑制子宮角粘連模型大鼠的術(shù)后粘連形成；進(jìn)一步，所述的硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)可用于制備治療子宮內(nèi)膜異位癥及其粘連的藥物

更具體的，本申請(qǐng)中，進(jìn)行了下述實(shí)驗(yàn)：

1.采用IL-1β誘導(dǎo)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞模型，使用ELISA檢測(cè)硫化氫供體硫氫化鈉(NaHS)對(duì)IL-1β誘導(dǎo)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞分泌IL-6的影響；Transwell模型檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)；CCK8檢測(cè)細(xì)胞活力；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡；