[發(fā)明專利]一種磷霉素降解菌篩選及其菌劑制備方法和該菌劑的應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610109635.4 | 申請日: | 2016-02-29 |
| 公開(公告)號: | CN105695386A | 公開(公告)日: | 2016-06-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 曾萍;宋永會;謝曉琳;劉峰;王遠(yuǎn)航;廖苗 | 申請(專利權(quán))人: | 中國環(huán)境科學(xué)研究院;東北制藥集團(tuán)股份有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/36 | 分類號: | C12N1/36;C12N1/02;C02F3/34 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100012 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 磷霉素 降解 篩選 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種磷霉素抗生素降解菌的篩選方法,其特征在于所述方法中使用的富集培養(yǎng)基、 篩選培養(yǎng)基和馴化培養(yǎng)基是除了營養(yǎng)元索,以磷霉素作為唯一碳源的培養(yǎng)基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種磷霉索抗生索降解菌的篩選方法,其特征在于所述含磷 霉索的培養(yǎng)液中磷霉素的濃度為100-200ppm,其余為營養(yǎng)元素和水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種磷霉素抗生素降解菌的篩選方法,其特征在于所述營養(yǎng) 元索的成份和濃度如下:(NH4)2SO41000-1200mg/L,KH2PO4800-1000mg/L,K2HPO4200-300mg/ L,MgSO4·7H2O500-600mg/L,F(xiàn)eSO410-20mg/L,CaCl250-70mg/L.使用時稀釋25-50倍左右。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種磷霉索抗生索降解菌的篩選方法,其特征在于具體步驟 為:
1)菌源的采集
以處理含有磷霉素抗生素制藥廢水污水處理廠的活性污泥為磷霉素降解土著菌的菌 源.
2)馴化
取自污水處理廠的活性污泥,先空曝2d后靜置12h,排出上清液,加入體積3L的反應(yīng)器 中,溫度控制在25-30℃,pH控制在6.5-7.5左右,設(shè)置轉(zhuǎn)速為150-200r/min,以磷霉素鈉作 為唯一碳源,對活性污泥進(jìn)行馴化.
3)菌種的純化
a)取馴化后的活性污泥的上清液,按照不同稀釋倍數(shù)涂布到篩選培養(yǎng)基平板上,35℃ 恒溫培養(yǎng)48h;
b)重復(fù)上述步驟,直至得到形態(tài)單一的純化菌落;
c)純化后的菌落按種于菌種保藏培養(yǎng)基斜面上,35℃恒溫培養(yǎng)48h后,保存于-20℃冰 箱。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種磷霉素抗生索降解菌的篩選方法,其特征在于:所述篩選 培養(yǎng)基為:無機(jī)鹽營養(yǎng)液和磷霉素鈉和營養(yǎng)鹽、微量元索制備.
其中無機(jī)營養(yǎng)液由以下營養(yǎng)元素組成:
營養(yǎng)液;(NH4)2SO41000mg/L,KH2PO4800mg/L,K2HPO4200mg/L,MgSO4·7H2O500mg/L, FeSO410mg/L,CaCl250mg/L;
微量元索:NiSO432mg/L,Na2BO7·H2O7.2mg/L,(NH4)6Mo7O24·H2O14.4mg/L, ZnCl223mg/L,CoCl2·H2O21mg/L,CuCl2·2H2O10mg/L,MnCl2·4H2O30mg/L.每升培養(yǎng)基加 50ml無機(jī)營養(yǎng)液、50ml微量元素、15g瓊脂,121℃滅菌30min,冷卻后加入200mg/L磷霉素.
所述菌種保藏培養(yǎng)基為:
胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、950ml純水、15g瓊脂.pH=7.0-7.2,121℃滅 菌30min。
6.一種磷霉索抗生索降解菌,其特征在于由權(quán)利要求1-5所述方法制備得到。
7.一種磷霉素抗生索降解菌菌劑,其特征在于:由權(quán)利要求6所述方法制備。
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