本發明提供了一種多肽在制備抗菌和/或殺菌藥物中的應用，尤其是在殺滅處于VBNC狀態的微生物中的應用，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述微生物包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和/或副溶血弧菌。本發明還提供了一種包含上述多肽的抗菌和/或殺菌的藥物組合物，可用于抑制和/或殺滅處于VBNC狀態的微生物。此外，本發明提供了一種殺滅處于VBNC狀態的微生物的方法，該方法是將處于VBNC狀態的微生物與所述多肽接觸。

技術領域

本發明涉及一種具有抗菌活性的多肽的應用；本發明還涉及含有其的藥物組合物以及殺滅VBNC狀態微生物的方法。

背景技術

VBNC(活的但不可培養的微生物(viable but non-culturable state,VBNC))狀態細菌是指原來可進行培養的微生物在不良外界環境的脅迫下進入了的一個休眠時期，用常規方法培養時，不能繁殖，但仍然具有新陳代謝活性的一種特殊存在形式，并在一定的環境條件下可以復蘇，即可以恢復到用常規方法培養的狀態。VBNC狀態菌因特定的自我保護機制使其能夠在不利環境條件下繼續存活較長時間，細菌的這種特殊VBNC狀態存活形式成為環境中病原體的重要組成部分。這對于細菌本身來說是非常有利的，但是對公共衛生卻具有極大威脅，因為進入VBNC狀態的細菌會保留若干毒力因素和潛在的毒力，且一旦復蘇便具有感染性。食品工業質量監測樣本和水分配系統，或臨床樣本檢測也會低估評估風險或檢測不到該狀態的活細胞，這無疑又增加了一層安全隱患。VBNC狀態的細菌因其具有不可培養的特點，不但可逃避傳統檢測方法的檢測，還對多種理化因子包括抗生素產生抗性，并在適當的條件下可復蘇，進而成為疫病發生的源頭。因此，VBNC狀態細菌是極大的公共衛生安全隱患，找到一種能夠安全、高效殺滅VBNC狀態細菌的方法意義重大。

抗微生物多肽又稱為抗菌肽(Antimicmbia1 peptides，AMPs)是生物體合成的一類小分子防御多肽，是動物固有免疫系統的重要成員。繼1972年瑞典科學家Boman等首先在果蠅中發現抗菌肽及其具有免疫功能(Boman HG,Nilsson I,Rasmuson B.Inducibleantibacterial defence system in Drosophila.Nature,1972,237:232-235)，隨后眾多研究者先后從細菌、真菌、高等植物、無脊椎動物、脊椎動物乃至人體中發現并分離獲得上千種具有抗菌活性的多肽。

抗菌肽的抑菌機制有桶-板模型(barrel stave model)、毯式模型(carpetmodel)及環狀孔模型(toroidal pore model)，關鍵都是通過其陽離子性接近細胞膜，再以其疏水性氨基酸插入生物膜，若濃度適宜或較高，形成跨膜通道或引起膜破碎，使細胞內物質外泄和跨膜電勢瓦解，從而導致細菌細胞裂解性的死亡；若抗菌肽濃度偏低時不足以裂解性殺死病原體，則會有一部分抗菌肽進入細胞與胞內多聚陰離子(如DNA、蛋白質)結合而抑制微生物的繁殖。抗菌肽的作用機制讓細菌等微生物難有機會產生有抗性的突變性，即不易產生耐藥性。

近年來研究發現，抗菌肽具有廣譜抗菌作用，對革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、真菌均有抑殺作用，還可以抗原蟲、抗病毒以及殺傷動物體內的腫瘤細胞，使其最有可能替代抗生素成為新一代相對安全的抗菌藥物(Guaní-Guerra E,Santos-Mendoza T,Lugo-Reyes SO,Terán LM.Antimicrobial peptides:general overview and clinical implications inhuman health and disease.Clin.Immunol.,2010,135(1):1-11.；Lakshmaiah NarayanaJ,Chen JY.Antimicrobial peptides:Possible anti-infective agents.Peptides,2015,72:88-94.)。