[發(fā)明專利]一種鴨疫里默氏菌感染鴨的酶聯(lián)免疫檢疫方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610036604.0 | 申請日： | 2016-01-20 |
| 公開（公告）號： | CN105675862B | 公開（公告）日： | 2017-09-05 |
| 發(fā)明（設計）人： | 李繼祥;范夢男;周琴;李昕;江勝;李歡 | 申請（專利權(quán)）人： | 西南大學 |
| 主分類號： | G01N33/569 | 分類號： | G01N33/569 |
| 代理公司： | 北京一格知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙)11316 | 代理人： | 滑春生 |
| 地址： | 402460 重慶*** | 國省代碼： | 重慶;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 鴨疫里默氏菌 感染 免疫 檢疫 方法 | ||
1.一種非診斷為目的鴨疫里默氏菌感染鴨的酶聯(lián)免疫檢疫方法，包括以下步驟：
(1)將鴨疫里默氏菌肽酶S8蛋白10.0μg/ml作為檢測抗原在37℃振蕩包被聚苯乙烯酶標板2小時；
(2)洗滌后用2％牛血清白蛋白在37℃封閉30分鐘；
(3)洗滌，將待檢血清用0.01M pH 7.4磷酸鹽緩沖液按1:200稀釋后加入酶標板孔反應45分鐘；
(4)洗滌，加入辣根過氧化物酶標記的山羊抗鴨IgG溶液反應45分鐘；
(5)洗滌，加入TMB顯色液避光反應15分鐘；
(6)加入終止液后混勻，酶標儀在波長450nm測定吸光值(OD450值)，
其中，所述鴨疫里默氏菌為AF株或SC株。
2.如權(quán)利要求1所述的檢疫方法，所述檢測抗原為：(1)鴨疫里默氏菌肽酶S8基因的全基因或部分序列的原核和真核表達的重組蛋白或(2)從鴨疫里默氏菌培養(yǎng)物中分離純化的肽酶S8蛋白及其片段。
3.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，步驟(2)至(5)中所述的洗滌，其洗滌液為含0.05％吐溫-20的0.01M pH7.4磷酸鹽緩沖液。
4.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，步驟(2)中所述2％牛血清白蛋白，其稀釋液為0.01M pH7.4磷酸鹽緩沖液。
5.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，步驟(6)中所述終止液為2.0M硫酸。
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