[發明專利]一種多肽抗原檢測牛結核分枝桿菌抗體的ELISA試劑盒有效
| 申請號： | 201610014747.1 | 申請日： | 2016-01-11 |
| 公開（公告）號： | CN105527446B | 公開（公告）日： | 2017-12-08 |
| 發明（設計）人： | 秦愛建;邵紅霞;葉建強;錢琨;趙巍 | 申請（專利權）人： | 揚州大學 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 揚州市錦江專利事務所32106 | 代理人： | 江平 |
| 地址： | 225009 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 多肽 抗原 檢測 結核 分枝桿菌 抗體 elisa 試劑盒 | ||
1.一種多肽抗原檢測牛結核分枝桿菌抗體的ELISA 試劑盒，其特征在于：包括牛結核分枝桿菌特異性多肽抗原包被的酶標板、陰性血清、陽性血清、抗體稀釋液、用辣根過氧化物酶標記的抗牛IgG酶標抗體、底物顯色液、終止液；所述牛結核分枝桿菌特異性多肽抗原為以下五種多肽抗原中的至少任意一種：
bTB-p-1 MAEMKTDAATLAQEAGNFMTEQQWNFAGIEAAAS；
bTB-p-2 QEAGNFERISGDLKTQAGIEAAASAIQGNVTS；
bTB-p-3 VVRFQEAANKQKQELDEIAIQGNVTSIHSLLDEG；
bTB-p-4 NIRQAGVQYSRADEEQQQKWDATATELNNALQNL；
bTB-p-5 RADEEQQQALSSQMGFGQAMASTEGNVTGMFA；
所述五種多肽抗原為利用牛結核分支桿菌特異性多肽，采用體外人工合成方法取得的多肽抗原。
2.根據權利要求1所述ELISA 試劑盒，其特征在于：所述牛結核分枝桿菌特異性多肽抗原包被的酶標板的制備方法是：取96孔酶標板，每孔100μL牛結核分枝桿菌特異性多肽抗原，4℃過夜包被，包被濃度為0.01μg/mL～5μg/mL，用PBST 洗滌液250μl/ 孔,洗滌2～4 次后拍干，用封閉液150μl/孔，37℃封閉1h，洗滌液PBST 250μl/ 孔洗滌3 次后拍干，放入真空袋，4℃、抽真空保存。
3.根據權利要求1所述ELISA 試劑盒，其特征在于：所述陽性血清為用抗體稀釋液按照體積比為1∶20～100 的比例將牛結核分枝桿菌標準陽性血清稀釋后取得的稀釋陽性血清；所述陰性血清為用抗體稀釋液按照體積比為1∶20～100 的比例將牛結核分枝桿菌標準陰性血清稀釋后取得的稀釋陰性血清。
4.根據權利要求1所述ELISA 試劑盒，其特征在于：所述抗體稀釋液為0.1%BSA。
5.根據權利要求1所述ELISA 試劑盒，其特征在于：所述用辣根過氧化物酶標記的抗牛IgG酶標抗體是用HRP保護液按工作濃度比例稀釋后的抗牛IgG酶標抗體。
6.根據權利要求1所述ELISA 試劑盒，其特征在于：所述底物顯色液為TMB。
7.根據權利要求1所述ELISA 試劑盒，其特征在于：所述終止液為0.1SDS%或2M的H2SO4。
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