[發(fā)明專利]ALKBH2基因在缺血性腦卒中診斷中的應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510853894.3 | 申請日: | 2015-11-30 |
| 公開(公告)號: | CN105296658A | 公開(公告)日: | 2016-02-03 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 楊承剛;邵小健 | 申請(專利權(quán))人: | 北京泱深生物信息技術(shù)有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;G01N33/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100080 北京市海*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | alkbh2 基因 缺血性 腦卒中 診斷 中的 應(yīng)用 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域,具體地涉及ALKBH2基因在缺血性腦卒中診斷中的用途。
背景技術(shù)
缺血性腦卒中是指突然發(fā)生的腦局部血液循環(huán)障礙導(dǎo)致腦組織缺血缺氧引起的局灶性神經(jīng)功能缺損綜合征。有四種類型的腦缺血:短暫性腦缺血發(fā)作、可逆性神經(jīng)功能障礙、進展性卒中、完全性卒中。缺血性腦卒中是世界范圍內(nèi)三大死亡疾病之一,也是成年人首位致殘原因。由于目前缺血性腦卒中的發(fā)病機制尚未完全清楚,且臨床上用于治療缺血性腦卒中的手段有限,使得該病不僅發(fā)病率高,致死率、致殘率及復(fù)發(fā)率也較高。
缺血性腦卒中是一種遺傳和環(huán)境因素共同作用的復(fù)雜性疾病,隨著人類基因組計劃的完成和分子遺傳學的發(fā)展,基因的研究受到廣泛重視,尋找疾病的基因標記物成為當前研究的熱點。今年來,越來越多研究認為,基因在缺血性腦卒中的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的調(diào)控作用,因此基因與缺血性腦卒中發(fā)病風險的關(guān)系也備受關(guān)注。
目前臨床上用于缺血性腦卒中診斷的方法包括:頭顱CT及MRI掃描、腦血管檢查(數(shù)字減影血管造影DSA、CT或MR血管成像)、經(jīng)顱多普勒檢查。但是上述方法的使用不能提供一種特異和敏感的診斷,盡管現(xiàn)在報道了一些與缺血性腦卒中相關(guān)的基因,但是并沒有應(yīng)用到臨床上,因此發(fā)現(xiàn)一種特異性的缺血性腦卒中標記物應(yīng)用于臨床診斷具有重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容
為了彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明的目的在于提供一種可用于缺血性腦卒中早期診斷的分子標志物-ALKBH2基因。相比傳統(tǒng)的缺血性腦卒中的診斷方法,使用基因標志物來診斷缺血性腦卒中具有及時性、特異性和靈敏性,使患者在疾病早期就能知曉風險,針對風險高低,采取相應(yīng)的預(yù)防和治療措施。
為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
本發(fā)明提供了一種ALKBH2基因及其表達產(chǎn)物在制備診斷缺血性腦卒中的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
進一步,上面所提到的診斷產(chǎn)品包括:通過RT-PCR、實時定量PCR、免疫檢測、原位雜交或芯片檢測ALKBH2基因及其表達產(chǎn)物的表達水平以診斷缺血性腦卒中的產(chǎn)品。
進一步,所述用RT-PCR診斷缺血性腦卒中的產(chǎn)品至少包括一對特異擴增ALKBH2基因的引物;所述用實時定量PCR診斷缺血性腦卒中的產(chǎn)品至少包括一對特異擴增ALKBH2基因的引物;所述用免疫檢測診斷缺血性腦卒中的產(chǎn)品包括:與ALKBH2蛋白特異性結(jié)合的抗體;所述用原位雜交診斷缺血性腦卒中的產(chǎn)品包括:與ALKBH2基因的核酸序列雜交的探針;所述用芯片診斷缺血性腦卒中的產(chǎn)品包括:蛋白芯片和基因芯片;其中,蛋白芯片包括與ALKBH2蛋白特異性結(jié)合的抗體,基因芯片包括與ALKBH2基因的核酸序列雜交的探針。
進一步,所述診斷產(chǎn)品包括芯片和/或試劑盒;其中所述芯片包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片;所述試劑盒包括基因檢測試劑盒和蛋白免疫檢測試劑盒。所述基因檢測試劑盒包括SYBRGreen聚合酶鏈式反應(yīng)體系、用于擴增ALKBH2基因和管家基因的引物對;所述SYBRGreen聚合酶鏈式反應(yīng)體系包含:PCR緩沖液、dNTPs、SYBRGreen熒光染料。
本發(fā)明提供了一種診斷缺血性腦卒中的產(chǎn)品,所述的產(chǎn)品能夠通過檢測ALKBH2基因的表達水平來診斷缺血性腦卒中。
進一步,上面所述的產(chǎn)品包括芯片、或試劑盒。其中,所述芯片包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片;所述基因芯片包括固相載體以及固定在固相載體上的寡核苷酸探針,所述寡核苷酸探針包括用于檢測ALKBH2基因轉(zhuǎn)錄水平的針對ALKBH2基因的寡核苷酸探針;所述蛋白質(zhì)芯片包括固相載體以及固定在固相載體上的ALKBH2蛋白的特異性抗體;所述試劑盒包括基因檢測試劑盒和蛋白免疫檢測試劑盒;所述基因檢測試劑盒包括用于檢測ALKBH2基因轉(zhuǎn)錄水平的試劑;所述蛋白免疫檢測試劑盒包括ALKBH2蛋白的特異性抗體。其中,所述基因芯片可用于檢測包括ALKBH2基因在內(nèi)的多個基因(例如,與缺血性腦卒中相關(guān)的多個基因)的表達水平。所述蛋白質(zhì)芯片可用于檢測包括ALKBH2蛋白在內(nèi)的多個蛋白質(zhì)(例如與缺血性腦卒中相關(guān)的多個蛋白質(zhì))的表達水平。通過將多個與缺血性腦卒中的標志物同時檢測,可大大提高缺血性腦卒中診斷的準確率。
進一步,上面所述試劑包括使用RT-PCR、實時定量PCR、免疫檢測、原位雜交或芯片方法檢測ALKBH2基因表達水平過程中所需的試劑。優(yōu)選地,所述試劑包括針對ALKBH2基因的引物和/或探針。
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