技術領域

本發明屬于生物技術和免疫學領域，具體涉及一種檢測空腸彎曲菌的酶聯免疫試劑盒。

背景技術

空腸彎曲菌(campylobacterjejunienteritis)是1973年Butzler等自腹瀉病人糞便中分離出來，目前已認識其為人類腹瀉的主要致病菌之一。空腸彎曲菌腸炎的發病率在發達國家超過細菌性痢疾，在發展中國家發病率幾乎等同于細菌性痢疾。本菌作為重要的食源性致病菌，隨著食物進入腸道后在含微量氧環境下迅速繁殖，主要侵犯空腸、回腸和結腸，侵襲腸粘膜，造成充血及出血性損傷，近年來觀察到有些菌株能產生類似霍亂腸毒素，引起腸腔內液體分泌增加。

目前空腸彎曲菌的檢測主要依賴于國標所規定的生化鑒定，其缺點是操作繁瑣、檢測周期較長，無法適應大量的樣品篩查。免疫學檢測是近年來出現的最快速、準確、穩定的快速檢測手段，但國內外目前尚無可運用于檢測實踐的快速檢測產品，該專利以空腸彎曲菌為檢測靶標，所要求保護的技術涉及空腸彎曲菌快速檢測產品。

發明內容

本發明的目的是提供一種檢測空腸彎曲菌的試劑盒。

進而，本發明提供了一種用于檢測空腸彎曲菌的酶聯免疫試劑盒，所述的試劑盒含有：

(a)固相載體，所述的固相載體上包被有作為捕捉抗體的抗空腸彎曲菌單克隆抗體3G2D8H3G9，所述的抗空腸彎曲菌單克隆抗體3G2D8H3G9由小鼠雜交瘤細胞系3G2D8H3G9，CGMCCNo.8766產生；

(b)容器a，所述的容器a中裝有作為檢測抗體的抗空腸彎曲菌單克隆抗體4C9E1G7H3，所述的抗空腸彎曲菌單克隆抗體4C9E1G7H3由小鼠雜交瘤細胞系4C9E1G7H3，CGMCCNo.8457產生。

在一優選例中，所述的固相載體為酶標反應板。

在另一優選例中，所述的檢測抗體帶有可檢測的標記物。

在另一優選例中，所述的可檢測的標記物為辣根過氧化物酶。

在另一優選例中，所述的試劑盒還含有陽性對照和陰性對照。

在另一優選例中，所述的陽性對照為滅活的空腸彎曲菌菌液，所述的陰性對照為滅菌的布氏肉湯。

本發明各個方面的細節將在隨后的章節中得以詳盡描述。通過下文以及權利要求的描述，本發明的特點、目的和優勢將更為明顯。

附圖說明

圖1本發明的單克隆抗體的SDS-PAGE電泳圖

Lane1：4C9E1G7H3，Lane3：3G2D8H3G9。

具體實施方式

本發明人的研究表明，以空腸彎曲菌作為免疫原，免疫Balb/c小鼠，分離純化得到兩株抗空腸彎曲菌單克隆抗體，即3G2D8H3G9，保藏號CGMCCNo.8766和4C9E1G7H3，保藏號CGMCCNo.8457，上述兩株單克隆抗體的抗體效價可達到1:100000，其能夠特異性、高效地與空腸彎曲菌結合。以上述單克隆抗體3G2D8H3G9包被酶標反應板作為捕捉抗體，用辣根過氧化物酶標記的上述單克隆抗體4C9E1G7H3作為檢測抗體，制作酶聯免疫檢測試劑盒。結果顯示，上述空腸彎曲菌檢測試劑盒檢測靈敏度達到10⁵cfu/ml，具有重復性、準確性好的優點，孔間誤差小于5％，板內CV小于3％。其與單增李斯特、豬霍亂沙門、鼠傷寒沙門、腸炎沙門、福氏志賀、宋內氏志賀、鮑氏志賀、出血性大腸桿菌O157:H7、阪崎腸桿菌、小腸耶爾森氏菌等共計91種細菌均無交叉反應。

在此基礎上，本發明人進而根據雙抗體夾心酶聯免疫法，經過反復測試，終于獲得了一種可快速、高效檢測食源性空腸彎曲菌的酶聯免疫試劑盒。

抗體

本發明包括兩株抗空腸彎曲菌單克隆抗體。本發明的兩株抗空腸彎曲菌單克隆抗體可以利用小鼠雜交瘤細胞系3G2D8H3G9(CGMCCNo.8766)和小鼠雜交瘤細胞系4C9E1G7H3(CGMCCNo.8457)分別分泌產生。