[發明專利]基于人骨髓瘤細胞株及人B淋巴細胞融合制備的全人抗體在審
| 申請號: | 201410459164.0 | 申請日: | 2014-09-10 |
| 公開(公告)號: | CN104195110A | 公開(公告)日: | 2014-12-10 |
| 發明(設計)人: | 張明順;王云生;楊永林;高峰 | 申請(專利權)人: | 張明順 |
| 主分類號: | C12N5/09 | 分類號: | C12N5/09;C12N5/22;C07K16/18;C12R1/91 |
| 代理公司: | 南京天華專利代理有限責任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬濤 |
| 地址: | 210029 *** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 基于 骨髓瘤 細胞株 淋巴 細胞融合 制備 全人 抗體 | ||
1.可以用于制備穩定雜交瘤細胞的人骨髓瘤細胞系,其中所述骨髓瘤細胞系稱 為WYZ-26。
2.一種制備人雜交瘤細胞的方法,其特征在于方法包括將權利要求1所述的人 骨髓瘤細胞系WYZ-26與漿細胞融合的步驟。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于包括下列步驟:a)篩查人骨髓瘤 細胞系;b)人工誘導骨髓瘤細胞系;c)選擇骨髓瘤細胞系。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于a)步驟包括:i)篩查選擇增殖迅速 的人骨髓瘤細胞系;ii)篩查選擇不產生抗體的人骨髓瘤細胞系;b)步驟包括: i)8-氮鳥嘌呤和6-巰基鳥嘌呤誘導細胞株獲得對次黃嘌呤、氨基喋呤和者胸 苷(HAT)敏感性;ii)進一步誘導細胞株對哇巴因耐受;iii)誘導細胞株對 聚乙二醇耐受;c)步驟包括:i)篩選能與漿細胞高效融合的骨髓瘤細胞;ii) 篩選能高效分泌人抗體的雜交瘤細胞;iii)篩選染色體型穩定的雜交瘤細胞。
5.根據權利要求2~4中任一項所述的方法,其特征在于所述漿細胞是來自主動 或者被動免疫志愿者的B淋巴細胞抗原特異性分化后的抗體分泌細胞。
6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于所述B淋巴細胞是i)外周血B淋 巴細胞;2)抗原特異性激活的淋巴細胞;ii)通流式細胞儀等分選富集的淋巴 細胞。
7.一種人雜交瘤細胞系,所述雜交瘤細胞系通過權利要求2-6中任一項所述 的方法制得。
8.一種全人單克隆抗體,由權利要求7所述的雜交瘤細胞系制得。
9.權利要求8的全人單克隆抗體可以用于制備治療或預防疾病的藥物。
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