技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及奈韋拉平在制備預防和治療炎癥相關疾病藥物中的應用。

背景技術

炎癥是一種對入侵的病原體或無菌性組織損傷的一種有益的宿主反應。炎癥反應是一種由細胞和炎性介質在時間和空間上共同作用的結果，達到中和或者消除損傷刺激來維持內環境穩態的結果。雖然炎癥主要是一種生理和有益的過程，但是不能消退的炎癥過程將導致許多炎癥疾病的發生，如類風濕性關節炎、炎癥性腸病、哮喘、牛皮癬、系統性紅斑狼瘡、多發性硬化、全身性脈管炎、動脈粥樣硬化、鼻炎等。

對于炎癥的治療，早期曾廣泛使用糖皮質激素類抗炎藥（地塞米松、強的松和可的松等），但長期使用會產生依賴性，易引起腎上腺皮質功能衰退等副作用。自20世紀50~60年代出現阿司匹林、保泰松、吲哚美辛、和布洛芬等藥物后，非甾體抗炎藥（NonsteroidalAntiinflammatoryDrugs，NSAIDs）引起了人們的關注，并逐漸成為抗炎藥研究和開發的重點。傳統的NSAIDs通過抑制COX，抑制炎癥部位前列腺素PG的合成，產生抗炎作用，由于胃腸道PG合成也受到了抑制，副作用較多。到20世紀90年代，發現COX存在兩種亞型：COX-1和COX-2。COX-1存在于大多數組織中，其功能是合成前列腺素來調節細胞的正常生理功能，對胃腸道黏膜起保護作用。COX-2是一個誘導酶，在正常生理狀態下，其水平很低，但在炎癥細胞中，被有絲分裂原（如LPS）和炎癥細胞因子（如TNF、IL-1、PAF）、內毒素等刺激，可導致COX-2的大量產生，表達水平升高數十倍，促進炎癥反應和組織損傷。選擇性的抑制COX-2的抑制劑成為研究熱點，現在上市的有塞來昔布（Celecoxib）、羅非昔布（Rofecoxib）、伐地昔布（Valdecoxib）和帕瑞昔布（Precoxib）等。但是由于選擇性COX-2抑制劑抑制血管內皮的前列腺素生成，使血管內的前列腺素和血小板中的血栓素動態平衡失調，導致血栓素升高，促進血栓形成。這也是COX-2的抑制劑引起心血管風險發生的一個主要原因。與此同時，隨著人們對促炎癥消退因子認識的深入，針對此策略的靶點研究越來越多。迄今為止發現的促炎癥消退介質有Cyclopentenoneprostaglandins、Lipoxins/resolvins、NF-κB、Mediatorsofapoptosis(caspases,CD44,etc.)、Annexin-1，針對上述靶點的藥物研發如火如荼的進行中。尋求新的化合物來治療無菌性炎癥和免疫性炎癥疾病已成為研發熱點和難點，開發自主知識產權的抗炎藥物迫在眉睫。

炎癥反應的最重要功能是將炎癥細胞輸送到炎癥局部，白細胞的滲出是炎癥反應最重要的特征。炎癥的不同階段，游出的白細胞也不同。在急性炎癥的早期，中性粒細胞首先游出，48小時后組織內則以單核細胞浸潤為主。中性粒細胞和單核細胞滲出可吞噬和降解細菌、免疫復合物和壞死組織碎片，構成炎癥反應的主要防御環節。但白細胞也可通過釋放酶、化學介質和毒性自由基等，引起組織損傷并可能延長炎癥過程。因此，促進炎癥部位中性粒細胞的消退是評價抗炎藥效的一個指標。

斑馬魚是一種脊椎動物，與人類基因同源性高達85%，其信號傳導通路與人類基本近似，生物結構和生理功能與哺乳動物高度相似，具有體積小（可用微孔板分析）、發育周期短、體外受精、透明（可直接用肉眼和解剖顯微鏡觀察）、單次產卵數較高等特點。斑馬魚模型既具有體外實驗快速、高效、低廉、用藥量小等優勢，又具有哺乳類動物實驗預測性強、可比度高、可觀察多個器官等優點，近年已在化合物藥效、毒性評價中得到廣泛應用。研究者建立了中性粒細胞特異發熒光的斑馬魚，利用硫酸銅特異的損傷斑馬魚側線附近的神經丘，引起中性粒細胞從血管中游出，向神經丘部位聚集，利用這一原理，研究者在此模型中進行了抗炎化合物的高通量篩選，直接定量觀察體內的炎癥反應，這一模型促進了抗炎藥物的篩選過程。

綜上所述，本研究利用硫酸銅誘導斑馬魚炎癥模型高通量篩選抗炎藥物，尋求新的化合物來有效抗炎，從而開發具有自主知識產權的抗炎藥物，為人類健康帶來福音。