[發明專利]一種上清丸的質量控制方法在審
| 申請號: | 201410432876.3 | 申請日: | 2014-08-28 |
| 公開(公告)號: | CN104155240A | 公開(公告)日: | 2014-11-19 |
| 發明(設計)人: | 王六貴;呂建英;陳偉 | 申請(專利權)人: | 山西振東開元制藥有限公司 |
| 主分類號: | G01N21/00 | 分類號: | G01N21/00;G01N30/90;G01N30/02 |
| 代理公司: | 山西五維專利事務所(有限公司) 14105 | 代理人: | 張志祥 |
| 地址: | 046108 山*** | 國省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 上清丸 質量 控制 方法 | ||
1.一種上清丸的質量控制方法,包括成分檢查步驟,其特征在于:它還包括成分鑒別和成分含量測定步驟;
所述成分鑒別步驟如下:
1)顯微鏡鑒別:取上清丸,置顯微鏡下觀察:草酸鈣簇晶大,直徑60~140μm為大黃;纖維束鮮黃色,周圍細胞含草酸鈣方晶,形成晶纖維,含晶細胞壁木化增厚為黃柏;纖維淡黃色,梭形,壁厚,孔溝細為黃芩;內果皮纖維上下層縱橫交錯,纖維短梭形為連翹;花粉粒類圓形,直徑24~34μm,外壁有刺,長3~5μm,具3個萌發孔為菊花;油管含金黃色分泌物,直徑約30μm為防風;果皮石細胞鑲嵌排列成層為梔子;
2)黃柏的薄層色譜鑒別:取上清丸1.2g,剪碎,加甲醇30ml,超聲處理20min,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇5ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃柏陰性樣品,黃柏陰性樣品由除去黃柏以外的其他同等處方量的藥材制成,同法制成陰性空白溶液;再取鹽酸小檗堿對照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取供試品溶液2μl、陰性空白溶液2μl和對照品溶液1μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水10:7:1:1為展開劑,展開,取出,晾干,置波長為365nm的紫外光燈下檢視;供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同黃綠色的熒光斑點,即為上清丸中含鹽酸小檗堿;
3)大黃的薄層色譜鑒別:取上清丸1.2g,剪碎,加甲醇30ml,超聲處理20min,濾過,濾液蒸干,殘渣加水10ml使溶解,再加鹽酸1ml,置水浴中加熱30min,立即冷卻,用乙醚振搖提取2次,每次20ml,合并乙醚液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液;另取大黃對照藥材0.1g及大黃陰性樣品,大黃陰性樣品由除去大黃以外的其他同等處方量的藥材和蜂蜜制成,同法制成對照藥材溶液與陰性空白溶液;再取大黃素對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取供試品溶液4μl、陰性空白溶液4μl、對照藥材溶液2μl和對照品溶液各2μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,在30~60℃的溫度下以石油醚-甲酸乙酯-甲酸15:5:1上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,分別置日光下和波長為365nm的紫外光燈下檢視;供試品色譜中,在與對照藥材色譜及對照品色譜相應的位置上,日光下顯相同顏色的斑點;紫外光燈下顯相同顏色的熒光斑點,即為上清丸中含大黃素;
4)梔子薄層色譜鑒別:取上清丸7g,剪碎,加硅藻土7g,研勻,加濃度為50%的甲醇50ml,超聲處理40min,濾過,濾液蒸干,殘渣加無水乙醇5ml使溶解,揮發至約0.5ml,作為供試品溶液;另取梔子藥材1g與梔子陰性樣品,梔子陰性樣品由除去梔子以外的其他同等處方量的藥材和蜂蜜制成,同法制成對照藥材溶液和陰性空白溶液;再取梔子苷對照品,加無水乙醇制成每1ml含3mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取供試品溶液10μl、陰性空白溶液10μl、對照藥材溶液10μl、對照品溶液4μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水5:5:1:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同的紫紅色斑點,即為上清丸中含梔子苷;
5)黃芩的薄層色譜鑒別:取上清丸3g,剪碎,加硅藻土3g,研勻,加乙酸乙酯-甲醇3:1的混合溶液50ml,加熱回流30min,自然冷卻至常溫,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇5ml使溶解,作為供試品溶液;另取黃芩對照藥材1g與黃芩陰性樣品,黃芩陰性樣品由除去黃芩以外的其他同等處方量的藥材和蜂蜜制成,同法制成對照藥材溶液和陰性空白溶液;再取黃芩苷對照品,加甲醇制成每1ml含3mg的溶液,作為對照品溶液;照薄層色譜法試驗,吸取供試品溶液10μl、陰性空白溶液10μl、對照藥材溶液4μl和對照品溶液各4μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水5:3:1.5:1為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰;供試品色譜中,在與對照藥材色譜及對照品色譜相應的位置上,顯相同的棕色斑點,即為上清丸中含黃芩苷;
所述成分含量測定步驟如下:
1)色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-0.2%磷酸溶液以48∶52為流動相;檢測波長為280nm;理論板數按黃芩苷峰計算應不低于5000;
2)對照品溶液的制備:精密稱取黃芩苷對照品適量,加甲醇制成每1ml含黃芩苷38μg的溶液,即得對照品溶液;
3)上清丸供試品溶液的制備:取重量差異項下的上清丸,剪碎,精密稱定5g,精密加入等量硅藻土,研細,混勻,精密稱定0.6g,置具塞錐形瓶中,精密加50ml濃度為70%的乙醇溶液,稱定重量,在功率為100W和頻率為40kHz的情況下超聲處理30min,自然冷卻至常溫,再稱定重量,用濃度為70%的乙醇溶液補足減失的重量,搖勻,濾過,取濾液,即得上清丸供試品溶液;
4)測定:分別精密吸取對照品溶液與上清丸供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得,每1g上清丸含黃芩苷不得少于5.21mg。
2.根據權利要求1所述的一種上清丸的質量控制方法,其特征在于:所述的上清丸是由菊花、薄荷、川芎、白芷、荊芥、防風、桔梗、連翹、梔子、酒炒的黃芩、酒炒的黃柏和酒炒的大黃制成,首先將各藥材粉碎成細粉,然后過篩并混勻,最后向每100g粉末中加入煉蜜90~110g,即得上清丸。
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