[發(fā)明專利]水稻品種9194抗黑條矮縮病位點(diǎn)qRBSDV9及其分子標(biāo)記方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410291342.3 | 申請(qǐng)日: | 2013-03-29 |
| 公開(公告)號(hào): | CN104046693A | 公開(公告)日: | 2014-09-17 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 萬建民;劉裕強(qiáng);江玲;孫志廣;胡金龍;王寶祥;王琦;趙志剛;王益華;陳亮明;劉世家;劉喜;陳賽華;張文偉;田云錄;王春明;徐大勇 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 南京農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12Q1/68 | 分類號(hào): | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬濤 |
| 地址: | 211225 江蘇省南京市溧*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 水稻 品種 9194 抗黑條矮縮病位點(diǎn) qrbsdv9 及其 分子 標(biāo)記 方法 | ||
1.水稻品種9194抗黑條矮縮病位點(diǎn)qRBSDV9的分子標(biāo)記方法,其特征在于:用分子標(biāo)記RM3912引物:SEQ?ID?NO.9/SEQ?ID?NO.10,或者用分子標(biāo)記RM257引物:SEQ?ID?NO.11/SEQ?ID?NO.12擴(kuò)增水稻抗黑條矮縮病品種或育種材料DNA,如果用分子標(biāo)記RM3912引物能夠擴(kuò)增出191bp的擴(kuò)增片段,或用分子標(biāo)記RM257引物能夠擴(kuò)增出155bp的擴(kuò)增片段均標(biāo)志著水稻品種抗黑條矮縮病位點(diǎn)qRBSDV9的存在。
2.篩選權(quán)利要求1所述的水稻品種9194抗黑條矮縮病位點(diǎn)的分子標(biāo)記的方法,其特征在于包含如下步驟:
(1)以抗黑條矮縮病品種9194為母本,感黑條矮縮病粳稻品種蘇御糯為父本,配制雜種F1,構(gòu)建了包含200個(gè)單株的F2分離群體,每個(gè)F2單株通過自交獲得相應(yīng)的F2:3家系,進(jìn)行抗黑條矮縮病鑒定;
(2)用SDS法提取親本、F1及F2群體各株系的DNA,采用簡單重復(fù)序列標(biāo)記SSR對(duì)兩親本進(jìn)行多態(tài)性篩選,PCR在PTC-200擴(kuò)增儀上進(jìn)行,擴(kuò)增產(chǎn)物在8%聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳分析,親本間有多態(tài)的引物在F2群體中進(jìn)行分析,獲取群體基因型資料;
(3)根據(jù)連鎖交換規(guī)律,利用群體基因型資料構(gòu)建水稻的遺傳圖譜,所用軟件為MAPMARKER/EXP3.0,用Kosambi函數(shù)將重組值轉(zhuǎn)換為遺傳距離;
(4)采用田間誘發(fā)結(jié)合室內(nèi)接種鑒定進(jìn)行黑條矮縮病的抗性鑒定;
(5)利用MAPMARKER/EXP3.0軟件對(duì)各個(gè)分子標(biāo)記的群體基因型和相應(yīng)家系的黑條矮縮病抗性級(jí)別進(jìn)行連鎖分析,并將Kosambi函數(shù)轉(zhuǎn)換為遺傳距離,利用Windows?QTL?Cartographer?V2.0軟件復(fù)合區(qū)間作圖法,以2cM為步長在全基因組范圍內(nèi)進(jìn)行掃描,QTL的檢測(cè)采用5%總體顯著水平,相應(yīng)LOD統(tǒng)計(jì)量的顯著閾值用排列測(cè)驗(yàn)方法進(jìn)行估計(jì),共重復(fù)抽樣1000次,同時(shí)估計(jì)了各位點(diǎn)的加性效應(yīng)和貢獻(xiàn)率;
(6)獲得抗黑條矮縮病品種9194抗黑條矮縮病基因位點(diǎn)四個(gè),分別為qRBSDV3,位于標(biāo)記RM282-RM14898之間;qRBSDV6,位于標(biāo)記RM20069-RM30之間;qRBSDV9,位于標(biāo)記RM3912-RM257之間;qRBSDV11,位于標(biāo)記RM26062-RM536之間,通過抗黑條矮縮病主基因的分子標(biāo)記來檢測(cè)抗性品種9194及其衍生品種(系)中是否含有該主基因位點(diǎn),預(yù)測(cè)其黑條矮縮病抗性水平,大大提高抗黑條矮縮病水稻的選擇效率。
3.權(quán)利要求1所述的水稻品種9194抗黑條矮縮病位點(diǎn)qRBSDV9的分子標(biāo)記引物,其特征在于包括分子標(biāo)記RM3912引物:SEQ?ID?NO.9/SEQ?ID?NO.10,或者分子標(biāo)記RM257引物:SEQ?ID?NO.11/SEQ?ID?NO.12。
4.權(quán)利要求3所述的水稻品種9194抗黑條矮縮病位點(diǎn)qRBSDV9的分子標(biāo)記引物在水稻育種中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于所述的分子標(biāo)記引物在快速篩選抗黑條矮縮病品種或品系中的應(yīng)用。
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