技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬海洋生物提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種從小球藻中提取海藻油的方法。

背景技術(shù)

隨著經(jīng)濟發(fā)展、生活水平的提高，高血壓、高血脂誘發(fā)的心血管病已成為威脅人類生命的重要疾病。由于海藻油中含有大量不飽和脂肪酸，尤其是含有人體必需的EPA、DHA，在預(yù)防心血管疾病、降血脂、降低膽固醇、減肥、抑制腫瘤生長、抗炎等方面具有明顯的作用，因而日趨受到人們的關(guān)注。微藻處于食物鏈的最低端，是初級生產(chǎn)力，可以通過光合自養(yǎng)方式進行大規(guī)模人工培養(yǎng)，具有生長周期短、繁殖快、不受季節(jié)和氣候的限制、易于提取等優(yōu)點，是生產(chǎn)海藻油的最優(yōu)原料。但大部分微藻尤其是小球藻具有堅韌的細胞壁，可阻礙油脂的提取，使其生物利用率低，因此在海藻油提取前必須對微藻細胞進行破壁處理。反復(fù)凍融具有操作簡便，不受外源性雜質(zhì)污染的特點，并且設(shè)備簡單，能源消耗低，適合對光和熱較敏感的活性物質(zhì)的提取，適合較大規(guī)模的生產(chǎn)。

?

發(fā)明內(nèi)容

??本發(fā)明提供一種采用反復(fù)凍融技術(shù)對小球藻進行破壁處理，提取提取海藻油的方法。

本發(fā)明一種從小球藻中提取海藻油的方法，按照以下步驟進行：

（1）小球藻藻泥的預(yù)處理：用去離子水清洗小球藻，以除去營養(yǎng)鹽及其他雜質(zhì)，清洗后的藻泥備用；

（2）稱取一定量的小球藻，于－?2?0?℃低溫下冷凍，以75~95%乙醇為溶劑，液料比為（2~4）:1，溫度25~50℃融解提取1~2?h?，提取時用快速混勻器間歇震蕩，反復(fù)凍融4~6?次提取，提取結(jié)束后，3500r/min?離心分離10min，收集上清液；上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸干，得到的海藻油在50℃下干燥至恒重。

隨著乙醇濃度的增大，出油率逐漸增大，趨勢明顯。由于原料小球藻為濕料，水分含量在70%，原料所帶水分降低了提取溶劑乙醇的有效濃度，要充分提取海藻油，需要較高濃度的乙醇。

隨提取溶劑劑量的增加，出油率在開始時提高明顯；當(dāng)液料比大于3?時，隨著液料比的增大，出油率沒有明顯變化，對于一定量的小球藻來說，溶劑的增加會降低混合油的濃度，增加了小球藻

與溶劑接觸面的濃度差，從而提高了油脂與溶劑間的擴散速率，出油率增大。但當(dāng)液料比繼續(xù)增大時，小球藻中海藻油大部分已被溶解出來，出油率增加緩慢，而過多的溶劑增加了后續(xù)分離過程，從經(jīng)濟角度考慮，選擇液料比3:1?較為合適。

隨著溫度的升高，出油率初始升高明顯，當(dāng)溫度升到4?5?℃以后，出油率趨于平穩(wěn)，溫度過高不但浪費電力而且增加了海藻油中不飽和脂肪酸的氧化，所以選取4?5?℃為最佳提取溫度。

本發(fā)明反復(fù)凍融具有操作簡便，不受外源性雜質(zhì)污染的特點，并且設(shè)備簡單，能源消耗低，適合對光和熱較敏感的活性物質(zhì)的提取，適合較大規(guī)模的生產(chǎn)。與常規(guī)法提取相比，反復(fù)凍融乙醇提取海藻油的方法具有設(shè)備簡單、易操作、提取時間短、無需加熱、綠色無毒、出油率高等優(yōu)點，所以有著廣闊的應(yīng)用前景。

?

具體實施方式

實施例1

一種從小球藻中提取海藻油的方法，按照以下步驟進行：

（1）小球藻藻泥的預(yù)處理：用去離子水清洗小球藻，以除去營養(yǎng)鹽及其他雜質(zhì)，清洗后的藻泥備用；

（2）稱取一定量的小球藻，于－?2?0?℃低溫下冷凍，以95%乙醇為溶劑，液料比為3:1，溫度45℃融解提取1h?，提取時用快速混勻器間歇震蕩，反復(fù)凍融5次提取，提取結(jié)束后，3500r/min?離心分離10min，收集上清液；上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸干，得到的海藻油在50℃下干燥至恒重。

????計算出油率，每組實驗三個平行，取平均值。海藻油質(zhì)量出油率(%?)?=海藻油質(zhì)量/小球藻干重質(zhì)量×?100本實施例中海藻油質(zhì)量出油率達24.28%。

?

實施例2

一種從小球藻中提取海藻油的方法，按照以下步驟進行：

（1）小球藻藻泥的預(yù)處理：用去離子水清洗小球藻，以除去營養(yǎng)鹽及其他雜質(zhì)，清洗后的藻泥備用；

（2）稱取一定量的小球藻，于－?2?0?℃低溫下冷凍，以75%乙醇為溶劑，液料比為2:1，溫度25℃融解提取2?h?，提取時用快速混勻器間歇震蕩，反復(fù)凍融4次提取，提取結(jié)束后，3500r/min?離心分離10min，收集上清液；上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸干，得到的海藻油在50℃下干燥至恒重。計算出油率，每組實驗三個平行，取平均值。出油率(%?)?=海藻油質(zhì)量/小球藻干重質(zhì)量×?100本實施例中海藻油質(zhì)量出油率達22.13%。

?

實施例3