技術領域

本發明屬海洋生物提取技術領域，特別涉及一種海藻油的提取方法。

背景技術

微藻蘊量豐富種類繁多,?地球上大約存在3萬多種不同門類的微藻。近年來的研究表明,?微藻中存在著豐富的結構獨特的有機化合物,?如多不飽和脂肪酸、多糖、抗生素、毒素等,?這些代謝產物具有多種多樣的生物活性。這些生物活性物質是人類及動物生長發育所必需的物質,?具有抗血栓、降血脂、防止血

小板聚結、舒張血管等功能,?對心腦血管疾病、關節炎、腎炎等疾病有良好的防治作用。此外,?這些生物活性物質還能促進腦細胞的生長發育,?改善大腦機能。作為食物鏈基礎的海洋微藻是EPA?和DHA的最初生產者,?動物體內的這些物質也是從微藻中轉化而來。隨著海洋漁業資源的日益衰減,?海洋微藻將成為人類獲得這些物質的主要資源。

球等鞭金藻是一種分布廣泛的海洋浮游單細胞藻類,?屬于金藻門,?金藻綱,?等鞭金藻目,?等鞭金藻科,?等鞭金藻屬。由于其個體小,?繁殖快,?營養豐富,?運動速度適中,?又無含纖維素的細胞壁,?易被貝類幼蟲捕捉、吞食和消化吸收,?因而是海產經濟雙殼動物幼蟲良好的基礎餌料。近來又有相關報道表明,?球等鞭金藻富含n?-?3多不飽和脂肪酸,?尤其富含DHA?和EPA?,?是一種具有DHA和EPA?生產潛力的藻種。

目前,?常采用的藻類油脂提取方法有:?酸熱法、索氏提取法、超臨界CO2?萃取法(?SCF-?CO2?)、有機溶劑法等。有機溶劑法中常見的溶劑主要有乙醚、異丙醚、氯仿、乙醚/乙醇、石油醚、氯仿/甲醇等。

發明內容

???本發明提供一種新的海藻油的提取方法，本發明一種海藻油的提取方法按照以下步驟進行：

（1）藻體凍融破碎處理：?球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉,?-?20℃?下冷凍,?45℃溫水浴中融化5m?in,?反復2次制成海藻漿,?鏡檢無完整藻體細胞；

（2）?海藻油提?。?稱取海藻漿,?按1:(4~12)的料液比加入體積比為1:(1~3)的乙醚/石油醚浸提劑,?充氮氣密封后于20~45℃，以150?r?/m?in)振搖，浸提2~7h;浸提物取上層液,?于旋轉蒸發儀60℃?,?吹氮氣氣氛中蒸去溶劑,?離心干燥得海藻油。

（3）海藻油中加入羥甲基纖維素鈉，加入的質量為海藻油的1-2%，攪拌均勻后紫外滅菌。

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微藻中的活性物質大多數存在于細胞內,?如何有效地破碎海藻細胞以充分釋放這些活性物質是亟需解決的一個關鍵性問題。目前,?主要破碎方法有研磨法、酸煮法、菌體自溶法(菌體在50℃?下保溫2~?3?d)、酶解法、反復凍融法、超聲波法等。本實驗采用反復凍融破碎藻體,?具有操作簡便,不受外源性雜質污染的特點,?并且設備簡單,?能源消耗低,?適合對光和熱較敏感的活性物質的提取和較

大規模的生產。經過2次反復凍融處理,?球等鞭金藻細胞的破碎率達99%?以上。

?在料液比、乙醚/石油醚體積比、提取溫度、提取時間4?個因素中,?乙醚/石油醚體積比對海藻油得率的影響最大,?其次是提取溫度、料液比、提取時間。

本發明設備簡單,?能源消耗低,?適合對光和熱較敏感的活性物質的提取和較大規模的生產，海藻油得率搞到40.?8?%。

具體實施方式

球等鞭金藻原種購于中國海洋大學藻種庫,?經實驗室活化后用于實驗藻種。石油醚、乙醚、乙醇、丙酮、尿素、氫氧化鉀、鹽酸均為市購。

實施例1

一種海藻油的提取方法按照以下步驟進行：

（1）藻體凍融破碎處理：?球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉,?-?20℃?下冷凍,?45℃溫水浴中融化5m?in,?反復2次制成海藻漿,?鏡檢無完整藻體細胞；

（2）?海藻油提取：?稱取海藻漿,?按1:?12的料液比加入體積比為1:2的乙醚/石油醚浸提劑,?充氮氣密封后于一定溫度下于20℃，以?150?r?/m?in速度振搖，于浸提5h;浸提物取上層液,?于旋轉蒸發儀60℃?,?吹氮氣氣氛中蒸去溶劑,?離心干燥得海藻油。

（3）海藻油中加入羥甲基纖維素鈉，加入的質量為海藻油的1-2%，攪拌均勻后紫外滅菌。

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??????經檢測所得海藻油得率為40.8%。

實施例2

一種海藻油的提取方法按照以下步驟進行：

（1）藻體凍融破碎處理：?球等鞭金藻冷凍干燥成海藻粉,?-?20℃?下冷凍,?45℃溫水浴中融化5m?in,?反復2次制成海藻漿,?鏡檢無完整藻體細胞；