技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域,涉及千金子素1(Euphoria?factor?L1,?EFL1)在制備腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑方面的應(yīng)用，特別是與抗腫瘤藥物合用治療多藥耐藥腫瘤，恢復(fù)腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的敏感性，本發(fā)明還涉及千金子素1逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥性的機(jī)制。

背景技術(shù)

????腫瘤細(xì)胞對(duì)一種抗癌藥物出現(xiàn)耐藥的同時(shí)，對(duì)其他結(jié)構(gòu)不同、作用機(jī)制不同的抗癌藥物也產(chǎn)生耐藥的現(xiàn)象稱為多藥耐藥性（multidrug?resistance,?MDR）。MDR?是腫瘤化療失敗的主要原因，也是化療領(lǐng)域亟需解決的難題。MDR?通常是由?ATP?結(jié)合盒?(ABC)?轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白過度表達(dá)介導(dǎo)產(chǎn)生的，ABC?轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可水解?ATP?并借由水解產(chǎn)生的能量將抗癌藥物外排出腫瘤細(xì)胞。人類基因組中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有48種不同的膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，并根據(jù)序列相似性分為7個(gè)亞家族(A-G)。其中，介導(dǎo)產(chǎn)生?MDR?的?ABC?轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族主要成員包括?ABC?轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白?B?亞家族成員1?(ABCB1；P-糖蛋白)、ABC?轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白?C?亞家族成員?(ABCCs，MDR?相關(guān)蛋白)?以及?ABC?亞家族?G?成員2?(ABCG2，乳腺癌耐藥蛋白，米托蒽醌耐藥蛋白，胎盤特定?ABC?轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)。這些轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白高度差異，但均能識(shí)別和泵出大量結(jié)構(gòu)不同的藥物，而這些藥物主要為疏水化合物。一般來(lái)說，除了某些轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的底物特異性重復(fù)外，每種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白均特定轉(zhuǎn)運(yùn)其對(duì)應(yīng)的藥物。經(jīng)?ABCB1?轉(zhuǎn)運(yùn)的藥物包括不帶電或稍帶電的疏水化合物，這其中包括大多數(shù)的化療藥物如長(zhǎng)春堿類、蒽環(huán)類、表鬼臼毒素、紫杉醇。ABCB1?(P-gp)?高表達(dá)而導(dǎo)致的?MDR?被稱為典型?MDR，也是臨床上最重要、最常見的導(dǎo)致腫瘤化療失敗的原因。

為了克服?MDR，研究人員致力于尋找?MDR?逆轉(zhuǎn)劑，以提高或恢復(fù)耐藥腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的敏感性，這是可行的逆轉(zhuǎn)?MDR?策略。已有?MDR?逆轉(zhuǎn)劑進(jìn)入了臨床試驗(yàn)，若研發(fā)成功并用于臨床，將有望改善化療面臨的耐藥困境。

傳統(tǒng)中藥千金子是大戟科植物續(xù)隨子?Euphorbia?lathyris?L.?的干燥種子，具有逐水消腫、破癥殺蟲的功效，有小毒。研究發(fā)現(xiàn)，千金子中的二萜類成分具有一定的抗腫瘤、逆轉(zhuǎn)?ABCB1?介導(dǎo)的?MDR?活性。千金子中的二萜類成分復(fù)雜，已有文獻(xiàn)報(bào)道的有12種化合物，結(jié)構(gòu)類型各異，如千金子二萜醇、環(huán)氧千金子二萜醇以及它們的生源重排產(chǎn)物，各種化合物含量高低不同，化學(xué)性質(zhì)與生理活性也不相同。除此，還存在多種尚未被純化和鑒定出來(lái)的化合物。由于尚不明確千金子中逆轉(zhuǎn)?ABCB1介導(dǎo)的腫瘤多藥耐藥的主要成分，并且對(duì)其機(jī)制缺乏研究，目前，利用目前中藥千金子來(lái)制備腫瘤耐藥逆轉(zhuǎn)劑的效率不高。并且，由于千金子的不同有效部位可能具有一定的毒性作用，在逆轉(zhuǎn)效率不高的情況下，很難在低濃度用藥的情況下，來(lái)獲得逆轉(zhuǎn)抗癌藥物外排的效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種有效的腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑。

發(fā)明提供了千金子素1在制備腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑方面的應(yīng)用，所述的腫瘤多藥耐藥逆轉(zhuǎn)為ABCB1所介導(dǎo)的。

千金子素1?(Euphoria?factor?L1?,?EFL1)結(jié)構(gòu)式如式1所示。

式1

發(fā)明公開并保護(hù)了千金子素1在制備抑制腫瘤細(xì)胞ABCB1外排抗腫瘤藥物的制劑方面的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述的抗腫瘤藥物為長(zhǎng)春堿類、蒽環(huán)類、表鬼臼毒素、紫杉醇中的一種或多種。

所述的腫瘤細(xì)胞為高表達(dá)ABCB1的耐藥腫瘤細(xì)胞，包括人口底癌耐藥細(xì)胞、乳腺癌耐藥細(xì)胞、慢性粒細(xì)胞白血病耐藥細(xì)胞等。作為其中的一些實(shí)施方案，所適用的腫瘤細(xì)胞包括例如人口底癌耐藥細(xì)胞KBv200、乳腺癌耐藥細(xì)胞MCF-7/adr、慢性粒細(xì)胞白血病耐藥細(xì)胞K562/ADR、K562/A02等。

作為更優(yōu)選的方案，所述的腫瘤細(xì)胞為人口底癌細(xì)胞。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，作用于人口底癌耐藥細(xì)胞KBv200是，本發(fā)明的逆轉(zhuǎn)效果最為明顯。

發(fā)明發(fā)現(xiàn)，在某些細(xì)胞中，千金子素1對(duì)ABCB1的外排作用的抑制非常明顯，這可能是因?yàn)椴煌?xì)胞中的ABCB1表達(dá)量及外排活性的差異，從而導(dǎo)致千金子素1產(chǎn)生或強(qiáng)或弱的抑制效果。