[發明專利]火焰南天竹的組培方法有效
| 申請號: | 201310270499.3 | 申請日: | 2013-06-28 |
| 公開(公告)號: | CN103314853A | 公開(公告)日: | 2013-09-25 |
| 發明(設計)人: | 王姍;王永平;鮑華鵬 | 申請(專利權)人: | 江蘇農林職業技術學院 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00;A01G1/00 |
| 代理公司: | 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224 | 代理人: | 董建林 |
| 地址: | 212400 江蘇省*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 火焰 南天竹 方法 | ||
1.火焰南天竹組培方法,其特征在于,包括以下步驟:
????(1)獲取無菌材料
????于春季剪取火焰南天竹新萌發的小芽,用洗衣粉或洗衣液清洗材料后,在自來水下流動沖洗30min后于超凈工作臺上,用75%的乙醇浸泡20-30s,再用0.l%的升汞溶液浸泡8-15min后,用無菌水沖洗6-8次,并吸干表面水分;
????(2)火焰南天竹的初代培養
取小芽基部,切成lcm長的小段,接種于pH值為5.8-6.2的小芽誘導培養基上,所述的小芽誘導培養基的成分為MS+WPM+6-BA2.0-5.0mg/L+NAA0.2-0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L,進行芽誘導培養;小芽接種于小芽誘導培養基25d后,開始產生愈傷組織,繼續培養1個月后,進行繼代增殖培養;
(3)火焰南天竹的增殖培養
將帶有愈傷組織的芽接種于pH值為5.8-6.2的不定芽增殖培養基上進行增殖培養,所述的增殖培養基的成分為MS+WPM+6-BA1.0-3.0mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L,先進行暗處理1周,再給予每日光照16h;
????(4)?生根壯苗培養
在不定芽增殖培養基中誘導出叢生芽后,將叢生芽分成小叢或單芽并接種于pH值為5.8-6.2的生根壯苗培養基中,所述的生根壯苗培養基的成分為MS+WPM+6-BA0.2-1.0mg/L+NAA
0.5-1.0?mg/L+IBA2.0-6.0?mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L,進行生根和壯苗培養;
(5)馴化移栽
當根長為2-4cm時,進行馴化移栽,將培養瓶移至大棚內煉苗7-10天,洗去培養基,根部浸泡1%高錳酸鉀溶液進行消毒,移栽入穴盤中,覆蓋薄膜,同時遮蔭75%,2周后除去薄膜,給予全光照,進行肥水管理。
2.根據權利要求1所述的火焰南天竹的組培方法,其特征在于,上述步驟(2)中,初代培養基的優選成分為MS+WPM+6-BA4.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L,pH為6.0。
3.根據權利要求1所述的火焰南天竹的組培方法,其特征在于,上述步驟(2)中,初代培養的培養溫度為24-26℃,每日光照16h,光照為30-40?mo1/ms。
4.根據權利要求1所述的火焰南天竹的組培方法,其特征在于,上述步驟(3)中,增殖培養基優選配方為MS+WPM+6-BA2.0mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L,pH為6.0。
5.根據權利要求1所述的火焰南天竹的組培方法,其特征在于,上述步驟(3)中,增殖培養的培養溫度為24-26℃,光照為30-40?mo1/ms。
6.根據權利要求1所述的火焰南天竹的組培方法,其特征在于,上述步驟(4)中,壯苗培養基的優選配方為MS+WPM+6-BA0.5mg/L+?NAA1.0mg/L+IBA4.0mg/L,pH為6.0。
7.根據權利要求1所述的火焰南天竹的組培方法,其特征在于,上述步驟(4)中,生根壯苗培養的培養溫度為24-26℃,光照為40-60?mo1/ms。
8.根據權利要求1-7中任一所述的火焰南天竹的組培方法,其特征在于,所述的小芽誘導培養基、增殖培養基和生根壯苗培養基中,MS與WPM等體積混合。
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