1.一種青霉素菌渣中青霉素G的高效液相色譜檢測方法，其特征在于青霉素菌渣中青霉素G的高效液相色譜檢測方法是按以下步驟完成的：

一、繪制標準曲線，擬合標準曲線方程：青霉素G標準品溶解于溶劑中，并利用溶劑稀釋配制成濃度在0.1μg·mL^-1～2000μg·mL^-1之間不同梯度濃度的青霉素G標準溶液，然后采用0.45μm針頭過濾器過濾，利用高效液相色譜法進行檢測，以色譜峰面積為縱坐標、以青霉素G標準溶液濃度為橫坐標將高效液相色譜法檢測繪制成標準曲線，然后進行擬合，得到標準曲線方程：Y=kX+b，方程中Y表示色譜峰面積，X表示青霉素G的濃度，k和b為常數(shù)；所述的溶劑由乙腈和水按乙腈與水的體積比為1:1混合而成；

二、提取：首先將青霉素菌渣加入提取液中，混合均勻后超聲提取25min～35min，然后進行離心分離，離心分離得到的上清液即為青霉素G粗提液，向青霉素G粗提液中加入無水硫酸鈉和正己烷，再次進行離心分離，離心分離后分三層，取中間層，即為青霉素G提取液；所述的青霉素菌渣的質(zhì)量與提取液的體積比為1g:(3mL～5mL)；所述的提取液由乙腈和質(zhì)量分數(shù)為0.3%的甲酸水溶液按乙腈與質(zhì)量分數(shù)為0.3%的甲酸水溶液的體積比為3:1混合而成；所述的無水硫酸鈉與青霉素菌渣的質(zhì)量比為(0.8～1.2):1；所述的正己烷的體積與青霉素菌渣的質(zhì)量比為(0.8mL～1.2mL):1g；

三、活化處理：首先采用5.0mL甲醇過Waters?Oasis-C₁₈固相萃取小柱，然后采用5.0mL蒸餾水過Waters?Oasis-C₁₈固相萃取小柱，即完成Waters?Oasis-C₁₈固相萃取小柱活化處理；

四、洗脫：在過柱流速為1.0mL·min^-1～3.0mL·min^-1和真空條件下將步驟二得到的青霉素G提取液過步驟三得到的活化處理后Waters?Oasis-C₁₈固相萃取小柱，然后采用質(zhì)量分數(shù)為5%的甲醇水溶液淋洗，再采用洗脫液進行洗脫，洗脫得到的液體在水浴溫度為24℃～26℃下N₂吹干，然后加入復(fù)溶溶劑溶解N₂吹干得到的固體，然后采用0.45μm針頭過濾器過濾，得到待檢測液；所述的洗脫液的體積與步驟二中所述的青霉素菌渣的質(zhì)量比為(0.6mL～1.0mL):1g；所述的洗脫液由乙腈和甲醇按乙腈與甲醇的體積比為3:1混合而成；所述的復(fù)溶溶劑的體積與步驟二中所述的青霉素菌渣的質(zhì)量比為0.2mL:1g；所述的復(fù)溶溶劑由乙腈和水按乙腈與水的體積比為1:1混合而成；

五、青霉素G的含量確定：利用高效液相色譜法進行檢測步驟四得到的待檢測液，根據(jù)色譜峰面積，利用外標法由步驟一得到的標準曲線方程：Y=kX+b計算步驟四得到的待檢測液中青霉素G的濃度，根據(jù)青霉素G的濃度計算出步驟四得到的待檢測液中青霉素G的質(zhì)量，即確定青霉素菌渣中青霉素G的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種青霉素菌渣中青霉素G的高效液相色譜檢測方法，其特征在于步驟一中所述的高效液相色譜法具體操作如下：以二元泵、恒溫箱、紫外檢測器和化學(xué)工作站組成的HPLC儀，以質(zhì)量分數(shù)為0.3%的甲酸水溶液/乙腈為流動相，本發(fā)明中水相A和有機相B體積比為60:40以流速1.0mL·min^-1恒速洗脫。恒速洗脫，色譜條件如下：

a、色譜柱：Eelipse?XDB-C₁₈；

b、流動相：水相A:質(zhì)量分數(shù)為0.3%的甲酸水溶液；有機相B:乙腈；且所述的水相A與有機相B的體積比為60:40；

c、洗脫方式：等度洗脫0.8mL·min^-1～1.2mL·min^-1；

d、檢測波長：UV215nm；

e、柱溫：30℃；

f、進樣量：10μL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種青霉素菌渣中青霉素G的高效液相色譜檢測方法，其特征在于步驟二中首先將青霉素菌渣加入提取液中，混合均勻后超聲提取30min，然后進行離心分離，離心分離得到的上清液即為青霉素G粗提液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種青霉素菌渣中青霉素G的高效液相色譜檢測方法，其特征在于步驟二中所述的青霉素菌渣的質(zhì)量與提取液的體積比為5g:20mL。