[發明專利]一種串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒有效
| 申請號: | 201310204923.4 | 申請日: | 2013-05-28 |
| 公開(公告)號: | CN103278584A | 公開(公告)日: | 2013-09-04 |
| 發明(設計)人: | 龔振華 | 申請(專利權)人: | 上海市兒童醫院 |
| 主分類號: | G01N30/04 | 分類號: | G01N30/04;G01N30/02 |
| 代理公司: | 上海天翔知識產權代理有限公司 31224 | 代理人: | 王裕 |
| 地址: | 200040 上海*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 串聯 質譜非 衍生 檢測 試劑盒 | ||
1.一種串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒,其包含同位素標記氨基酸標準品混合物、同位素標記酰基肉堿標準品混合物、萃取液、流動相,其特征在于所述萃取液由甲醇、水、飽和一元羧酸組成,甲醇∶水∶飽和一元羧酸體積比為1000∶1~50∶0.01~2。
2.如權利要求1所述的串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒,其特征在于所述飽和一元羧酸為甲酸、乙酸、丙酸或丁酸中之一或它們的組合。
3.如權利要求1所述的串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒,其特征在于所述飽和一元羧酸為甲酸。
4.如權利要求1所述的串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒,其特征在于所述流動相為甲醇、水、飽和一元羧酸混合液,其中甲醇∶水∶飽和一元羧酸體積比為1000∶1~50∶0.01~2。
5.如權利要求4所述的串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒,其特征在于所述飽和一元羧酸為甲酸。
6.如權利要求1所述的串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒,其特征在于所述串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒還包含U型底耐熱96孔萃取板、V型底96孔檢測板、粘性萃取板貼膜和檢測板鋁箔。
7.如權利要求1所述的串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒,其特征在于所述串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒還包含氨基酸和酰基肉堿新生兒篩查質控品。
8.權利要求1所述串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒在檢測樣品中氨基酸和酰基肉堿的用途。
9.如權利要求8所述的用途,其特征在于所述樣品為體液,所述體液為血液、血漿、尿液或唾液中之一。
10.權利要求1所述串聯質譜非衍生化法檢測試劑盒的使用方法,包括下列步驟:
a)內標液制備:使用1.0ml的萃取液加入氨基酸內標的凍干粉小瓶中,蓋緊瓶蓋,震蕩,使其中的粉末完全溶解;使用1.0ml的萃取液加入酰基肉堿內標的凍干粉小瓶中,蓋緊瓶蓋,震蕩,使其中的粉末完全溶解;
b)工作液制備:將內標液置于室溫20分鐘;以每孔100μl萃取液用量,計算當日測定樣本和指控所需的萃取液總量;以體積比108:1:1加入萃取液、氨基酸內標液和酰基肉堿內標液,即配成工作液;
c)取樣:將質控血片、樣本血片在96孔板排序;用3.2mm打孔器順序將血片打入U型底耐熱96孔萃取板中;
d)樣本萃取:將100μl含內標的工作液分別加入96孔板的反應孔中,萃取樣本;用粘性貼膜密封孔板,在45℃的孵育震蕩器中,700rpm震蕩45分鐘;
e)樣本上機檢測:揭去密封膜,用移液器每孔移出80μl上清液,順序置入潔凈96孔板,用鋁箔密封96孔板,放入質譜自動進樣器托盤,供質譜檢測,進樣20ul,進樣速度:0~0.2min為0.12ml/min,0.2~1.2min為0.015ml/min,1.2~1.5min為0.5ml/min。每份樣本1.7min;采用串聯質譜儀電噴霧陽離子方式,離子源溫度120℃,解離溫度350℃,噴霧電壓3.5KV,氮氣650l/h,錐孔氣50l/h;多反應監測模式收集數據,每個離子對0.05ms依次循環檢測離子對,每份樣本采集0.3-1.3min時間段的檢測信號,疊加信號強度供定量。
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