技術領域

本發明涉及一種紅花黃芪提取物指紋圖譜的鑒別方法，具體地說是用高效液相色譜指紋圖譜法來對紅花黃芪提取物的有效成分進行質量控制的一種鑒別方法。

背景技術

紅花具有活血通徑、散瘀止痛的功效，為菊科植物紅花Carthamustinctorius L.的干燥花。中國藥典2010版以羥基紅花黃色素A、山柰素(C₁₅H₁₀0₆) 為指標進行含量測定；姚苗苗采用RP-HPLC法同時測定紅花中羥基紅花黃色素A與紅花黃色素A的含量（藥物分析雜志, 2010年 02期）。黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalusmembranaceus (Fisch)Bge.var.mongholicus(Bge)Hsiao或膜莢黃芪Astragalusmembranaceus (Fisch)Bge.的干燥根。黃芪含黃酮、皂苷類成分；黃酮類成分如芒柄花素、3'-羥基芒柄花黃素（毛蕊異黃酮）及其葡萄糖苷、2',3'-二羥基-7,4'-二甲氧基異黃酮、7,2'-二羥基-3',4'-二甲氧基異黃烷及其葡萄糖苷、7,3'-二羥基- 4',5'- 二甲氧基異黃烷、3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷及其葡萄糖苷等；皂苷類成分有黃芪皂苷Ⅰ～Ⅷ及大豆皂苷Ⅰ；黃芪甲苷（即黃芪皂苷IV）與黃芪乙苷。中國藥典2010版黃芪以黃芪甲苷(C₂₂H₂₂0₁₀)、毛蕊異黃酮葡萄糖苷(C₂₂H₂₂O₁₀)為指標進行含量測定；李顏建立高效液相色譜法測定黃芪飲片中4個異黃酮成分毛蕊異黃酮-7-葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊異黃酮、芒柄花素的含量方法（中國藥師,2012年 02期）；王宗權采用HPLC-ELSD法測定不同產地黃芪藥材中的黃芪皂苷Ⅰ、黃芪皂苷Ⅱ和黃芪皂苷Ⅳ的含量（藥物分析雜志, 2010年 07期）。

中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經適當處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標示其化學特征的色譜圖或光譜圖。中藥指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，它是建立在中藥化學成分系統研究的基礎上，主要用于評價中藥材以及中藥制劑半成品質量的真實性、優良性和穩定性。“整體性”和“模糊性”為其顯著特點。中國食品藥品監督管理局于2000年頒布了《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術要求（暫行）》，要求中藥注射劑必須進行指紋圖譜的研究，并建立其相關的標準。規范了中藥指紋圖譜的研究，從而掀起了國內近幾年來對指紋圖譜的研究熱潮。目前，采用指紋圖譜技術除了能反映幾乎全部成分的含量、種類外，尚能反映成分的比例、未知成分（含量測定方法中可能已被作為無效或干擾成分扣除）的產生，更多的是從藥物穩定性、安全性上進行監測。目前中藥提取物產業發展迅速，但其質量控制技術水平不高，對質量控制較成熟的方法有單個成分含量測定或一類成分如總皂苷、總黃酮等的紫外分光光度測定法，不能對提取物進行全面直觀的質量控制。本發明通過指紋圖譜技術對紅花黃芪提取物種的化學成分進行整體控制和綜合評價，能夠有效的鑒別紅花黃芪提取物的質量。

發明內容

本發明的目的是提供一種紅花黃芪提取物的指紋圖譜鑒別方法，通過指紋圖譜測定對紅花黃芪提取物進行全面而有效的鑒別。

紅花黃芪提取物的制備方法：

以紅花、黃芪為原料，兩味藥材以重量份計為：紅花80-150g，黃芪150-280g。取紅花、黃芪，混合，加水煎煮，煎液濃縮后加乙醇沉淀，吸取上清液，回收乙醇，再加水稀釋，靜置，取上清液制成。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的。

本發明紅花黃芪提取物的指紋圖譜鑒別方法，該方法包括如下步驟：

(a)色譜條件與系統適應性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈或甲醇、乙腈甲醇混合溶劑為流動相A，以甲酸水溶液或冰醋酸水溶液、磷酸水溶液、三氟乙酸水溶液為流動相B。檢測器為紫外檢測器、示差檢測器或蒸發光檢測器；

(b)精密吸取供試品溶液至量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，收取濾液，備用。

(c)測定法 吸取供試品溶液適量，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，即得。

進一步優選的測定條件為：