技術領域

本發明涉及一種高效液相色譜法檢測藥物中殘留有機溶劑的方法。

背景技術

N,N-二甲基甲酰胺（N，N-dimethyl?formamide,DMF）是一種無色高沸點有機溶劑，其沸點為153℃。N,N-二甲基甲酰胺（DMF）能與水、乙醇、乙醚、醛、酮、酯、鹵代烴和芳烴等混溶。其結構式為：

其分子式為：C₃H₇NO，分子量：73.10

N，N-二甲基乙酰胺（N,N-Dimethylacetamide，DMAC）是一種無色透明有機溶劑，其沸點為166℃。能與水、醇、醚、酯、苯、三氯甲烷和芳香化合物等有機溶劑任意混合。其結構式為：

其分子式為：C₄H₉NO，分子量：87.12

N-甲基吡咯烷酮（N-Methyl-2-Pyrrolidone，NMP）是一種無色透明油狀液體，微有胺的氣味，其沸點為203℃。能與水、醇、醚、酯、酮、鹵代烴、芳烴和蓖麻油互溶。揮發度低，熱穩定性、化學穩定性均佳，能隨水蒸氣揮發。有吸濕性。對光敏感。其結構式為：

其分子式為：C₅H₉NO，分子量：99.13

在藥物合成過程中，DMF常常作為反應試劑或重結晶試劑；DMAC在醫藥和農藥上大量用來合成抗菌素和農藥殺蟲劑；NMP是一種極性的非質子傳遞溶劑，廣泛用于農藥、醫藥和清潔劑等方面。在各國藥典中藥物中殘留的DMF，DMAC和NMP均屬于二類溶劑，是限制使用的，其殘留限度分別是0.088％，0.109％和0.053％。

目前，藥物中殘留溶劑檢測方法主要是頂空-氣相色譜法。由于DMF，DMAC和NMP沸點高（分別是153℃，166℃和203℃），法規要求其殘留限度低（分別是0.088％（880ppm），0.109%（1090ppm）和0.053％（530ppm）），用頂空氣相色譜法常不能達到其檢測靈敏度。因此，藥典建議采用直接進樣-氣相色譜法檢測這種高沸點溶劑DMF，DMAC和NMP，增大進樣口溫度，從而更好地氣化DMF，DMAC和NMP，達到其檢測靈敏度。但是，在實際操作中，直接進樣-氣相色譜法中，水相直接進樣會對氣相色譜儀及色譜柱造成不同程度的損害，對于水溶性藥物，尤其是只能溶于水的藥物，是不能采用直接進樣-氣相色譜法來進行檢測，故水溶性藥物中殘留DMF，DMAC和NMP的檢測成為難題。該現象亟待解決。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術中水溶性藥物中殘留N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）的檢測難度大，且可操作性不強的缺陷，提供一種利用高效液相色譜法（HPLC）檢測藥物中殘留有機溶劑的方法，該方法能夠精確檢測水溶性藥物中殘留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP），方便快捷，靈敏度高，可檢測低濃度樣品，且準確度高。

高效液相色譜法（HPLC）是色譜法的重要分支，是以液體（不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等）為流動相，采用高壓輸液系統，將流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器（最常用的是紫外檢測器）進行檢測，從而實現對樣品的分析。

現有技術中，沒有用高效液相色譜法（HPLC）進行水溶性藥物中殘留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）檢測的方法。本發明的發明人，根據高效液相色譜法的上述性質，嘗試選擇適合的條件，進行藥物中殘留的N,N-二甲基甲酰胺（DMF），N-N-二甲基乙酰胺（DMAC）和N-甲基吡咯烷酮（NMP）的檢測。該技術方案，填補了現有技術的空白，具有深遠而重大的意義。

本發明的目的之一是，提供一種高效液相色譜法（HPLC）檢測藥物中殘留有機溶劑的方法；

其步驟包括：將經過預處理的待測樣品進行高效液相色譜法（HPLC）檢測，即可；其中，所述的檢測使用梯度洗脫的方法，流動相A為緩沖鹽緩沖液，流動相B為乙腈；所述的緩沖鹽為截止波長≤210nm的緩沖鹽；

所述的梯度洗脫的條件為：以流動相A與流動相B的體積比為（90：10）~（98：2）洗脫5分鐘；之后以流動相A與流動相B的體積比為（20：80）~（10：90）洗脫，或線性洗脫至流動相A與流動相B的體積比為（20：80）~（10：90）；洗脫至雜質除去，即可。