相關(guān)專利申請案的交叉參考

本申請案主張優(yōu)先于2011年6月14日提出申請的美國臨時(shí)申請案61/496,761，所述申請案的全文以引用方式并入本文中。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及鑒別在本發(fā)明技術(shù)之前會被歸類為不可接受胚胎移植和人工授精方法以誘導(dǎo)妊娠的生殖哺乳動物。

背景技術(shù)

近年來，在乳品工業(yè)中，母牛的生殖效率已顯著降低。這表現(xiàn)為如下工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)生殖性能測量的不合意降低：(1)首次配種天數(shù)，(2)受孕天數(shù)，(3)產(chǎn)犢間隔，(4)每次受孕的配種次數(shù)，(5)不返情率，(6)動情(或“發(fā)情”)檢測率，和(7)妊娠率。具體來說，動情或發(fā)情檢測可用于鑒別如果在動情檢測時(shí)或之后不久授精可能妊娠的母牛。將母牛錯(cuò)誤地鑒別為未“發(fā)情”(即，“動情陰性(estrus-negative)”)是生殖效率低的重要因素。這對乳品工業(yè)造成相應(yīng)的重要影響，因?yàn)闆]有生殖效率的乳牛會被淘汰。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)方面是選擇可接受胚胎移植的哺乳動物的方法，其包含：(1)使至少兩個(gè)哺乳動物的動情周期同步；(2)從步驟(1)中的至少兩個(gè)哺乳動物中選擇在其卵巢中存在黃體(CL)的哺乳動物；(3)將胚胎移植到步驟(2)中所選的哺乳動物中；和(4)測試哺乳動物對妊娠的接受性。

因此，在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明提供鑒別可接受胚胎移植的哺乳動物的方法，其包含(A)使兩個(gè)或兩個(gè)以上哺乳動物的動情周期同步；(B)將胚胎移植到具有黃體但已鑒別為不在動情期或動情陰性的哺乳動物中；和(C)測試哺乳動物的妊娠情況，其中妊娠哺乳動物指示哺乳動物對胚胎移植的接受性。

在一個(gè)實(shí)施例中，哺乳動物是母牛。在另一個(gè)實(shí)施例中，同步化是通過向至少兩個(gè)哺乳動物投與前列腺素來實(shí)現(xiàn)。在另一個(gè)實(shí)施例中，同步化是通過投與前列腺素、促性腺素和黃體酮中的一種或一種以上來實(shí)現(xiàn)。

在另一個(gè)實(shí)施例中，哺乳動物是母牛且黃體的存在是通過選自由以下組成的群組的方法來檢測：(i)直腸觸診；(ii)超聲檢查；(iii)測量母牛血液中孕酮的濃度；和(iv)測量母牛產(chǎn)生的乳汁中孕酮的濃度。

在另一個(gè)實(shí)施例中，哺乳動物是母牛且胚胎介于5日齡與10日齡之間。

在另一個(gè)實(shí)施例中，哺乳動物為“動情陰性”，即哺乳動物未“發(fā)情或不顯示明顯的發(fā)情跡象”。在另一實(shí)施例中，至少兩個(gè)動情陰性哺乳動物是母牛。

在另一個(gè)實(shí)施例中，同步化是通過向至少兩個(gè)動情陰性母牛投與前列腺素來實(shí)現(xiàn)。在同步化程序中，可結(jié)合其它藥物來使用前列腺素。

在另一個(gè)實(shí)施例中，其中黃體在至少兩個(gè)動情陰性母牛中的存在是通過選自由以下組成的群組的方法來檢測：(i)直腸觸診；(ii)超聲檢查；(iii)測量母牛血液中孕酮的濃度；和(iv)測量母牛產(chǎn)生的乳汁中孕酮的濃度。

在另一實(shí)施例中，待移植到至少兩個(gè)動情陰性母牛的胚胎介于5日齡與8日齡之間。

在另一實(shí)施例中，待移植胚胎是新鮮胚胎、冷凍胚胎、玻璃化胚胎、活體內(nèi)胚胎、活體外受精胚胎、通過體細(xì)胞核移植產(chǎn)生的胚胎、通過胚胎細(xì)胞核移植產(chǎn)生的胚胎、通過胚胎分割產(chǎn)生的胚胎、通過精子顯微注射產(chǎn)生的胚胎、通過遺傳修飾產(chǎn)生的胚胎和/或通過遺傳選擇產(chǎn)生的胚胎。

在另一實(shí)施例中，待接收胚胎的哺乳動物在動情周期中的第6天與第10天之間。

另一實(shí)施例包含檢測哺乳動物是否在動情期或“在發(fā)情期”，以鑒別動情陽性(estrus-positive)和動情陰性哺乳動物。

另一實(shí)施例包含檢測在已鑒別為不在動情期或動情陰性的哺乳動物中是否存在卵巢黃體。

本發(fā)明的另一方面是選擇可接受胚胎移植的哺乳動物的方法，其包含：(1)使至少兩個(gè)哺乳動物的動情周期同步；(2)從步驟(1)中的至少兩個(gè)哺乳動物中選擇動情陰性的哺乳動物；(3)從步驟(2)中的哺乳動物中選擇在其卵巢中存在黃體(CL)的哺乳動物；(4)將胚胎移植到步驟(3)中的所選哺乳動物中；和(5)測試哺乳動物對妊娠的接受性。

在一個(gè)實(shí)施例中，選擇可接受胚胎移植的哺乳動物的方法進(jìn)一步包含在步驟(1)與(2)之間從至少兩個(gè)哺乳動物選擇動情陽性哺乳動物，其中將胚胎移植到步驟(3)中所選動情陽性哺乳動物和具有CL的哺乳動物中。在另一個(gè)實(shí)施例中，至少兩個(gè)哺乳動物是母牛。