技術領域

本發明涉及一種快速檢測皮革真實屬性的試劑盒。?

背景技術

PCR是聚合酶鏈式反應的簡稱，是分子生物學中廣泛運用的一項技術，主要原理是通過熱循環，達到目的基因片段的大量擴增。目前這項技術越來越廣泛地運用于產品檢測之中。例如，運用PCR技術檢測牛奶或臘腸中的植物成分等，運用PCR技術檢測肉骨粉等產品中的動物源性成分等，運用PCR技術檢測食品中的轉基因成分等。?

皮革主要是由哺乳類動物毛皮加工而成，是我國重要的出口創匯產品。天然皮革按其動物來源種類分，主要有牛皮革、羊皮革、豬皮革、馬皮革、兔皮革等。由于天然皮革種類繁多，價格昂貴，一些不法商販為了尋求利益的最大化，以人造革冒充天然皮革，或以低檔皮革冒充高檔皮革，損害了廣大消費者的健康和利益，對社會經濟以及皮革產業發展產生了不利的影響。?

目前，國內外皮革材質的鑒別主要仍以手摸眼看的感官鑒定方法為主，隨著皮革加工技術的提高，在某些方面，感官鑒別方法已很難鑒別出皮革種類，急需開發更為科學有效的方法。?

實用新型內容

基于此，本發明提供了一種快速檢測皮革真實屬性的試劑盒。該試劑盒主要是依據不同種類皮革所承載的遺傳信息存在差異，通過基因檢測技術特異性?地分析皮革樣品中的DNA信息來區分皮革種類。?

一種快速檢測皮革真實屬性的試劑盒，包括盒體，盒體內主要有：具有放置試劑瓶的下凹瓶位、位于下凹瓶位上的試劑瓶；所述試劑瓶包括裝有DNA提取緩沖液的試劑瓶，裝有Taq?DNA聚合酶的試劑瓶，裝有PCR反應液的試劑瓶和裝有上樣緩沖液的試劑瓶。?

本實用新型從遺傳學角度對皮革樣品基因成分進行分析鑒別，克服了傳統的感官鑒別方法所面臨的難題，具有特異性強、靈敏度高、方法重現性好、檢測快速簡便等優點，彌補了當前皮革基因檢測方法的空白，為皮革種類的鑒定提供了一種精確且易于標準化的分析方法，為質量監督等提供了技術支持，可廣泛應用于皮革包括毛皮等樣品基因的提取、皮革品種鑒定等方面，具有良好的經濟社會效益與重大的推廣應用價值，對于有效監管皮革產品質量，保護廣大消費者利益具有重大意義。?

附圖說明

圖1為本發明實施例1的快速檢測皮革真實屬性的試劑盒的結構圖。?

具體實施方式

以下結合具體實施例來詳細說明本實用新型。?

實施例1快速檢測皮革真實屬性的試劑盒?

請參考圖1，所述快速檢測皮革真實屬性的試劑盒的盒體1內具有固定泡沫模具形成的下凹瓶位2(共有4個下凹瓶位)，下凹瓶位2用于放置裝有溶液的試劑瓶；所述試劑瓶包括：裝有DNA提取緩沖液的試劑瓶，裝有Taq?DNA聚合酶的試劑瓶，裝有PCR反應液的試劑瓶和裝有上樣緩沖液的試劑瓶。?

上述試劑盒里的試劑瓶的成分及制備如下：(可供進行50份PCR反應)：?

(1)DNA提取緩沖液(100mL)?

分別稱取2.00mg?CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)、1.21mg?Tris.HCl(三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽)、0.58g?EDTA₂Na(乙二胺四乙酸二鈉)和8.18g?NaCl于容量瓶中，用水定容至100mL，混勻。經過120℃、30min，高溫消毒滅菌后，再加入10.00mg購置的蛋白酶K(購自大連寶生物公司)，15.43g二硫蘇糖醇(DTT)。?

(2)Taq?DNA聚合酶(25μl)?

購置Taq?DNA聚合酶25μl共125IU(購自大連寶生物公司)。?

(3)PCR反應液(1000μl)?

首先制備引物，制備的引物濃度為100nmol/L。?

按照本領域常規方法制備引物。在DNA自動合成儀(采用美國ABI公司的ABI3949型全自動DNA合成儀)上按照制造商的說明書進行合成。分別合成如下引物：?

動物基因成分通用引物，正向：5’-cctgagaaacggctaccat-3’(SEQ?ID?NO.1)；?

動物基因成分通用引物，反向：5’-cgtgtcaggattgggtaat-3’(SEQ?ID?NO.2)；?

牛線粒體基因的正向引物：5’-gccatatactctccttggtgaca-3’(SEQ?ID?NO.3)；?

牛線粒體基因的反向引物：5’-gtaggcttgggaatagtacga-3’(SEQ?ID?NO.4)；?