技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種控制害蟲(chóng)的方法，特別是涉及一種用在植物中表達(dá)的Cry1F蛋白來(lái)控制二點(diǎn)委夜蛾為害植物的方法。

背景技術(shù)

二點(diǎn)委夜蛾（Athetis?lepigone）屬鱗翅目夜蛾科，為雜食性害蟲(chóng)，目前發(fā)現(xiàn)其主要為害玉米作物，主要分布于我國(guó)黃淮海夏玉米種植區(qū)，在境外主要分布于日本、朝鮮、俄羅斯、歐洲等地。二點(diǎn)委夜蛾主要在玉米氣生根處的土壤表層處為害玉米根部，咬斷玉米地上莖桿或淺表層根，受為害的玉米田輕者玉米植株?yáng)|倒西歪，重者造成缺苗斷壟，玉米田中出現(xiàn)大面積空白地，為害嚴(yán)重地塊甚至毀種。

玉米是中國(guó)主要的糧食作物，2011年7月9日，中央電視臺(tái)新聞聯(lián)播首次報(bào)道二點(diǎn)委夜蛾在中國(guó)的發(fā)生情況，2011年秋季至2012年5月31日，國(guó)家玉米產(chǎn)業(yè)體系病蟲(chóng)防控研究室通過(guò)多次田間調(diào)查，發(fā)現(xiàn)2012年度二點(diǎn)委夜蛾的越冬種群數(shù)量較大，蟲(chóng)口基數(shù)偏高，一代幼蟲(chóng)種群密度大，在黃淮海夏玉米苗期有繼續(xù)暴發(fā)為害的可能。為了防治二點(diǎn)委夜蛾，人們目前主要采用的防治方法有：農(nóng)業(yè)防治和化學(xué)防治。

農(nóng)業(yè)防治是對(duì)整個(gè)農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中多個(gè)因素的綜合協(xié)調(diào)管理，調(diào)控作物、害蟲(chóng)、環(huán)境因素、創(chuàng)造一個(gè)有利于作物生長(zhǎng)而不利于二點(diǎn)委夜蛾發(fā)生的農(nóng)田生態(tài)環(huán)境，如及時(shí)清除玉米苗基部麥秸、雜草等覆蓋物至遠(yuǎn)離植株的玉米大行間并裸露出地面，以便于后續(xù)用藥劑能直接接觸到二點(diǎn)委夜蛾。因農(nóng)業(yè)防治必須服從作物布局和增產(chǎn)的要求，應(yīng)用有一定的局限性，不能作為應(yīng)急措施，在二點(diǎn)委夜蛾爆發(fā)時(shí)就顯得無(wú)能為力。

化學(xué)防治即農(nóng)藥防治，是利用化學(xué)殺蟲(chóng)劑來(lái)殺滅害蟲(chóng)，是二點(diǎn)委夜蛾綜合治理的重要組成部分，它具有快速、方便、簡(jiǎn)便和高經(jīng)濟(jì)效益的特點(diǎn)，特別是二點(diǎn)委夜蛾大發(fā)生的情況下，是必不可少的應(yīng)急措施，它可以一定程度地在二點(diǎn)委夜蛾造成為害前降低蟲(chóng)口密度。目前化學(xué)防治方法主要有毒餌法、毒土法、灌藥法和噴施農(nóng)藥等。但化學(xué)防治也有其局限性，如使用不當(dāng)往往會(huì)導(dǎo)致農(nóng)作物發(fā)生藥害、害蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性，以及殺傷天敵、污染環(huán)境，使農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)遭到破壞和農(nóng)藥殘留對(duì)人、畜的安全構(gòu)成威脅等不良后果。且因二點(diǎn)委夜蛾喜潮濕、陰暗環(huán)境，一般躲藏于麥秸等覆蓋物或者土表之下，使得化學(xué)農(nóng)藥很難直接接觸二點(diǎn)委夜蛾蟲(chóng)體而使得防治效果不佳。

為了解決農(nóng)業(yè)防治和化學(xué)防治在實(shí)際應(yīng)用中的局限性，科學(xué)家們經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)將編碼殺蟲(chóng)蛋白的抗蟲(chóng)基因轉(zhuǎn)入植物中，可獲得一些抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物以防治植物蟲(chóng)害。Cry1F殺蟲(chóng)蛋白是眾多殺蟲(chóng)蛋白中的一種，是由蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生的不溶性伴孢結(jié)晶蛋白。

Cry1F蛋白被昆蟲(chóng)攝入進(jìn)入中腸，毒蛋白原毒素被溶解在昆蟲(chóng)中腸的堿性pH環(huán)境下。蛋白N-和C-末端被堿性蛋白酶消化，將原毒素轉(zhuǎn)變成活性片段；活性片段和昆蟲(chóng)中腸上皮細(xì)胞膜上受體結(jié)合，插入腸膜，導(dǎo)致細(xì)胞膜出現(xiàn)穿孔病灶，破壞細(xì)胞膜內(nèi)外的滲透壓變化及pH平衡等，擾亂昆蟲(chóng)的消化過(guò)程，最終導(dǎo)致其死亡。?

已證明轉(zhuǎn)Cry1F基因的植株可以抵抗小地老虎等鱗翅目（Lepidoptera）害蟲(chóng)的侵害，然而，至今尚無(wú)關(guān)于通過(guò)產(chǎn)生表達(dá)Cry1F蛋白的轉(zhuǎn)基因植株來(lái)控制二點(diǎn)委夜蛾對(duì)植物為害的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種控制害蟲(chóng)的方法，首次提供了通過(guò)產(chǎn)生表達(dá)Cry1F蛋白的轉(zhuǎn)基因植株來(lái)控制二點(diǎn)委夜蛾對(duì)植物為害的方法，且有效克服現(xiàn)有技術(shù)農(nóng)業(yè)防治、化學(xué)防治和生物防治等技術(shù)缺陷。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種控制二點(diǎn)委夜蛾害蟲(chóng)的方法，包括將二點(diǎn)委夜蛾害蟲(chóng)與Cry1F蛋白接觸。

優(yōu)選地，所述Cry1F蛋白為Cry1Fa蛋白。

進(jìn)一步地，所述Cry1Fa蛋白存在于產(chǎn)生所述Cry1Fa蛋白的植物細(xì)胞中，所述二點(diǎn)委夜蛾害蟲(chóng)通過(guò)攝食所述植物細(xì)胞與所述Cry1Fa蛋白接觸。

更進(jìn)一步地，所述Cry1Fa蛋白存在于產(chǎn)生所述Cry1Fa蛋白的轉(zhuǎn)基因植物中，所述二點(diǎn)委夜蛾害蟲(chóng)通過(guò)攝食所述轉(zhuǎn)基因植物的組織與所述Cry1Fa蛋白接觸，接觸后所述二點(diǎn)委夜蛾害蟲(chóng)生長(zhǎng)受到抑制并最終導(dǎo)致死亡，以實(shí)現(xiàn)對(duì)二點(diǎn)委夜蛾為害植物的控制。

所述轉(zhuǎn)基因植物可以處于任意生育期。

所述轉(zhuǎn)基因植物的組織可以為根、葉片、莖稈、雄穗、雌穗、花藥或花絲。

所述對(duì)二點(diǎn)委夜蛾為害植物的控制不因種植地點(diǎn)的改變而改變。

所述對(duì)二點(diǎn)委夜蛾為害植物的控制不因種植時(shí)間的改變而改變。

所述植物可以為玉米。