技術領域

本發明屬于醫藥領域，涉及化合物的制藥新用途。

背景技術

膠質瘤是臨床上常見的惡性腫瘤之一，具有復發率高、病程進展快、死亡率高的特點，目前仍缺乏安全、有效的治療手段。最近研究發現，膠質瘤復發率高可能與膠質瘤干細胞密切相關，膠質瘤干細胞存在于腦膠質瘤組織中，對放療和化療均不敏感，是膠質瘤復發的根源。因此，靶向膠質瘤干細胞的治療藥物的研發，可能提高膠質瘤的治愈率。

非典型精神病藥物——喹硫平主要用于治療精神分裂癥，且副反應較少。迄今為止，尚未見喹硫平具有抗膠質瘤作用的相關報道。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于考察喹硫平是否具有抗膠質瘤和膠質瘤干細胞的作用，從而提供喹硫平在制藥領域中的新用途。

為達到上述目的，本發明通過在體和離體實驗，對喹硫平的抗膠質瘤和膠質瘤干細胞的作用進行了考察。在體實驗結果顯示，喹硫平能通過抑制膠質瘤細胞的增殖來抑制膠質瘤的生長，并促進膠質瘤細胞向少突膠質樣細胞分化；離體實驗結果顯示，喹硫平能抑制膠質瘤干細胞的增殖，并促進其向少突膠質樣細胞分化成熟。從而證實了喹硫平具有抗膠質瘤作用并能夠以膠質瘤干細胞為作用靶點發揮抗膠質瘤作用，可用于制備治療膠質瘤的藥物，對膠質瘤的治療及預后起到良好的效果。

本發明的有益效果在于：本發明公開了喹硫平在制備治療膠質瘤的藥物中的新用途，不僅拓寬了喹硫平的應用范圍，提升了其市場價值，而且為膠質瘤的治療提供了一種新的藥物。

附圖說明

為了使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將結合附圖對喹硫平的抗膠質瘤作用作進一步描述，其中：

圖1?顯示了喹硫平抑制膠質瘤生長，其中A為喹硫平治療組和對照組在21天時的膠質瘤大小對比（每組各3只動物，重復實驗2次），B為喹硫平治療組和對照組的膠質瘤生長曲線。

圖2?顯示了抑制膠質瘤細胞增殖，并促進其向少突膠質樣細胞分化，其中A為免疫組織化學檢測喹硫平治療組和對照組膠質瘤中增殖細胞核抗原（PCNA）和GFAP陽性細胞數，B為RT-PCR檢測喹硫平治療組和對照組膠質瘤中細胞增殖相關基因和少突膠質細胞相關基因的表達，C為Western?blotting檢測喹硫平治療組和對照組膠質瘤中少突膠質相關蛋白和星形膠質細胞標志物GFAP的表達。

圖3?顯示了喹硫平抑制膠質瘤干細胞增殖，其中A為CCK-8比色法檢測喹硫平對細胞活性的影響，B為流式細胞檢測喹硫平對細胞周期的影響。

圖4?顯示了喹硫平促進膠質瘤干細胞向少突膠質樣細胞分化，其中A為喹硫平處理組（左）和對照組（右）膠質瘤干細胞在分化培養4天后的顯微視圖，B為喹硫平處理組和對照組膠質瘤干細胞在分化培養4天后的少突膠質樣細胞百分率，C為qRT-PCR檢測喹硫平處理組和對照組膠質瘤干細胞在分化培養4天后的MBP和GFAP?mRNA水平。

上述各圖中，QUE表示喹硫平治療組或喹硫平處理組，CTL表示對照組。

具體實施方式

下面將通過具體實驗例對喹硫平的抗膠質瘤作用進行詳細的描述。

一、實驗材料及儀器

1．實驗動物和生物材料

6-8周成年裸鼠（雄性）20只，體重18-22克，由中國人民解放軍第三軍醫大學實驗動物中心提供。小鼠成膠質瘤細胞株GL261由中國人民解放軍第三軍醫大學附屬第一醫院病理研究所提供。

2．實驗試劑

喹硫平（阿斯利康公司），Trizol?試劑盒（Invitrogen公司），RIPA裂解液和PMSF（申能博彩生物科技有限公司），小鼠抗PCNA（Dako公司），兔抗GFAP（博士德公司），DMEM/?F12、胎牛血清、青霉素、鏈霉素和B27（Gibcol公司），多聚甲醛、重組人EGF（rhEGF）和Accutase溶液（Sigma公司），bFGF（Upstate公司），CCK-8試劑盒（碧云天生物技術有限公司），SYBR?primescript?RT-PCR試劑盒（TaKaRa公司）。

3．實驗儀器

冰凍切片機（Leica公司）、共聚焦激光掃描顯微鏡（Olympus公司）、酶標儀（Bio-rad公司）、Rotor-Gene?6000?實時遺傳分析儀（Corbett?Life?Science公司）。

二、實驗方法和結果

（一）在體實驗

1．喹硫平抑制膠質瘤生長