[發明專利]玉米MuDR轉座子插入側翼序列的分離方法在審
| 申請號： | 201210201905.6 | 申請日： | 2012-06-19 |
| 公開（公告）號： | CN102876667A | 公開（公告）日： | 2013-01-16 |
| 發明（設計）人： | 陶勇生;張祖新;王婷婷;楊偉峰 | 申請（專利權）人： | 陶勇生 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100041 北京市*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 玉米 mudr 座子 插入 側翼 序列 分離 方法 | ||
1.一種玉米MuDR轉座子插入側翼序列的分離方法，其特征在于：包括如下步驟：?
第一、MuDR誘變材料的制取：用雜交方式構建誘變群體，并篩選出突變體材料；
第二、突變體材料的DNA提取；
第三、巢式引物和簡并引物設計：在MuDR轉座子TIR序列的保守序列設計巢式引物TIR9-1和TIR9-2序列，所述TIR9-1序列為：ATAGAAGCCAACGCCATGGCCTCCATTTCGTC，所述TIR9-2序列為：GGCCTCCATTTCGTCGAATCCCTT；簡并引物是根據物種共享的蛋白質的保守氨基酸序列設計；
第四、進行MuTAIL-PCR反應，并在反應中添加甘油和二甲基亞砜；
第五、MuDR轉座子插入側翼序列的真實性檢測。
2.?根據權利要求1所述的分離方法，其特征在于：所述巢式引物TIR9-1和TIR9-2的序列，是根據對突變體材料DNA的測序和MuDR特異性引物擴增的結果，獲得MuDR的TIR序列；然后，將MuDR的TIR序列與Mutator轉座子家族其他成員的TIR進行比對，獲得了MuDR-TIR特異性序列區域，并以此為基礎設計了巢式引物TIR9-1和TIR9-2。
3.?根據權利要求2所述的分離方法，其特征在于：所述分離方法還包括對MuTAIL-PCR反應的產物使用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測。
4.根據權利要求3所述的分離方法，其特征在于：所述MuTAIL-PCR反應包括第一輪反應和第二輪反應，所述第一輪反應中包括利用巢式引物TIR9-2和簡并引物進行預擴增，并進行高特異性循環。
5.根據權利要求4所述的分離方法，其特征在于：所述第二輪反應中包括利用巢式引物TIR9-2和簡并引物進行擴增，并進行超級循環。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于陶勇生，未經陶勇生許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.17sss.com.cn/pat/books/201210201905.6/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：一種金屬外殼燈
- 下一篇：一種納米改性陽離子環氧樹脂的制備方法及其應用
