技術領域

?本發明屬于醫藥技術領域，公開了一種芹糖甘草素的制備方法。

背景技術

芹糖甘草素，為三萜苷類化合物。英文名：Apioglycyrrhizin。無色細針狀結晶，mp.193-195℃。[α]23/D+43°(c=0.29,甲醇)。分子式為C₄₁H₆₂O₁₄，分子量為778.93，分子結構如下：

。

芹糖甘草素來源于豆科(Leguminosae)脹果甘草Glycyrrhiza?inflata?Batal.根及甘Glycyrrhiza?uralensis?Fisch.根。芹糖甘草素具有鎮痛、解熱、消炎和鎮咳等作用，還可作為甜味劑使用，其甜味是甘草甜素的2倍。

脹果甘草（Glycyrrhiza?inflata?Batalin），別名：歐甘草。屬于豆科被子植物，為多年生草本，主要分布于甘肅河西走廊和新疆，生于鹽漬化砂地。脹果甘草的根及根莖含三萜類化合物如甘草甜素（Glycyrrhizin），芹糖甘草素（Apioglycyrrhizin）為甘草的甜味成分，其根中尚含黃酮類化合物，主要有甘草甙（Liquiritin）、甘草甙元（Liquiritigenin）等。

現有專利“抗流感病毒的藥物有效部位及活性成分的分離制備方法”（申請號：01134681），該專利采用大孔樹脂對抗流感有效成分進行初步富集，未得到高純度的芹糖甘草素。本發明采用常規大孔樹脂柱分離和高效液相色譜相結合的方法制備芹糖甘草素。該方法操作簡單，產品純度高，可達98%以上。

發明內容

本發明的目的是提供一種芹糖甘草素的制備方法，具體來說，是采用大孔樹脂和液相結合的方法制備芹糖甘草素。

一種芹糖甘草素的制備方法，其特征在于包括下列步驟：

（1）提取：將脹果甘草粉碎，經乙醇水溶液提取后，趁熱過濾、合并提取液，減壓濃縮至無醇味；

（2）萃取：將提取物用石油醚萃取，棄去萃取液；

（3）柱層析：將水層上大孔樹脂柱吸附，丙酮-水洗脫，分步收集，每份約500ml，合并芹糖甘草素流分，低溫濃縮至有沉淀析出，靜置過夜，濾出沉淀；

（4）純化：將上述沉淀物溶于甲醇溶液中，超聲溶解，用半制備型液相色譜純化，收集保留流分，減壓濃縮、結晶并干燥得到無色針晶。

步驟（1）中所述乙醇濃度體積百分比為60-90%，液料比為6-12:1（V/W）。

步驟（3）中所述大孔樹脂為所述洗脫條件為先用水洗脫除雜質，然后改用丙酮-水（80:20）洗脫。

步驟（3）中所述低溫為0-10℃。

步驟（4）中所述半制備型高效液相色譜條件為：ODS?C18，5μm，250*20.0mm(I.D.)，流動相組成體積比：甲醇-水（65-80:20-35），流速5-20ml/min，柱溫：室溫。

本發明的積極效果為：本發明制備的芹糖甘草素純度高、可作甜味劑使用，原料豐富易得，應用前景廣闊。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

取1kg脹果甘草粉碎，加入6倍量90%乙醇水溶液提取，趁熱過濾、合并提取液，減壓濃縮至無醇味，用石油醚萃取，棄去萃取液，水層上大孔樹脂柱吸附，先用水洗脫除雜質，然后改用丙酮-水（80:20）洗脫，分步收集，每份約500ml，合并芹糖甘草素流分，10℃低溫濃縮至有沉淀析出，靜置過夜，濾出沉淀，用甲醇超聲溶解，進樣至半制備型液相色譜精制，所用柱填料為C18，5μm，250×20.0mm(I.D.)，流動相組成體積比：甲醇-水（65:35），流速5ml/min，柱溫：室溫。按照色譜峰進行切割收集合并，減壓濃縮，靜置析晶，干燥得到芹糖甘草素無色針晶2.8g，含量99.2%。

實施例2：