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[發明專利]一種野菊花提取物及其指紋圖譜檢測方法有效

專利信息
申請號: 201210178415.9 申請日: 2012-06-01
公開(公告)號: CN102706978A 公開(公告)日: 2012-10-03
發明(設計)人: 李錚;劉洋;胡宇馳;汪國鵬;潘艷麗;方敏 申請(專利權)人: 北京市藥品檢驗所
主分類號: G01N30/02 分類號: G01N30/02;G01N30/06
代理公司: 北京市惠誠律師事務所 11353 代理人: 雷志剛;潘士霖
地址: 100035 北*** 國省代碼: 北京;11
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 野菊花 提取物 及其 指紋 圖譜 檢測 方法
【權利要求書】:

1.制備野菊花提取物的方法,其包括以下步驟:將野菊花藥材粉碎;加入藥材重量5-30倍的水提取30-120分鐘;再加入水體積1-3倍的95%乙醇繼續加熱回流提取30-90分鐘;提取液回收乙醇并濃縮、干燥,即得。

2.一種野菊花提取物,其是基本上按照權利要求1所述的方法提取得到的。

3.一種野菊花藥材或野菊花提取物的指紋圖譜檢測方法,該方法包括如下步驟:

(a)取供測試的野菊花藥材或供測試的野菊花提取物,所述供測試的野菊花藥材照權利要求1所述方法處理得到野菊花提取物(由此獲得的野菊花提取物或者前述供測試的野菊花提取物,二者可稱為供試品,或者可稱為供試品提取物);

(b)另取對照的野菊花藥材或對照的野菊花提取物,所述對照的野菊花藥材照權利要求1所述方法處理得到野菊花提取物(由此獲得的野菊花提取物或者前述對照的野菊花提取物,二者可稱為對照品,或者可稱為對照品提取物);

(c)分別精密稱取供試品提取物和對照品提取物適量,用50-100倍體積的甲醇溶解,經0.45μm微孔濾膜過濾,濾液分別稱為供試品溶液和對照品溶液,用于高效液相色譜(HPLC)分析;

(d)高效液相色譜條件為:色譜柱為C18色譜柱,流動相為0.1%的磷酸水溶液-乙腈;流速0.8~1.2ml/min;采用200-400nm波長紫外檢測記錄每一波長下成分響應值的方式檢測;梯度洗脫方式為:

(e)吸取步驟(c)的供試品溶液和對照品溶液,分別將其注入高效液相色譜中,照(d)項所述色譜條件進行洗脫,分別得到供試品HPLC圖和對照品HPLC圖;

(f)比較步驟(e)所得供試品HPLC圖和對照品HPLC圖。

4.一種野菊花藥材或野菊花提取物的指紋圖譜檢測方法,該方法包括如下步驟:

(i)取供測試的野菊花藥材或供測試的野菊花提取物,所述供測試的野菊花藥材照權利要求1所述方法處理得到野菊花提取物(由此獲得的野菊花提取物或者前述供測試的野菊花提取物,二者可稱為供試品,或者可稱為供試品提取物);

(ii)另取對照的野菊花藥材或對照的野菊花提取物,所述對照的野菊花藥材照權利要求1所述方法處理得到野菊花提取物(由此獲得的野菊花提取物或者前述對照的野菊花提取物,二者可稱為對照品,或者可稱為對照品提取物);

(iii)分別精密稱取供試品提取物和對照品提取物適量,用50-100倍體積的甲醇溶解,經0.45μm微孔濾膜過濾,濾液分別稱為供試品溶液和對照品溶液,用于高效液相色譜(HPLC)分析;

(iv)高效液相色譜條件為:色譜柱為C18色譜柱,流動相為0.1%的磷酸水溶液-乙腈;流速0.8~1.2ml/min;采用200-400nm波長紫外檢測記錄每一波長下成分響應值的方式檢測;梯度洗脫方式為:

(v)吸取步驟(iii)的供試品溶液和對照品溶液,分別將其注入高效液相色譜中,照(iv)項所述色譜條件進行洗脫,分別得到供試品HPLC圖和對照品HPLC圖;

(vi)比較步驟(v)所得供試品HPLC圖和對照品HPLC圖;

(vii)使哺乳動物分別口服步驟(i)的供試品提取物或者步驟(ii)的對照品提取物,口服后0.5-10小時內取生物樣品,提取該生物樣品,得到生物供試品溶液(由步驟(i)的供試品提取物口服后獲得)或生物對照品溶液(由步驟(ii)的對照品提取物口服后獲得);

(viii)吸取步驟(vii)的生物供試品溶液和生物對照品溶液,分別將其注入高效液相色譜中,照(iv)項所述色譜條件進行洗脫,分別得到生物供試品HPLC圖和生物對照品HPLC圖;

(ix)比較步驟(viii)所得生物供試品HPLC圖和生物對照品HPLC圖。

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