[發明專利]用陽離子脂質體形成金納米球殼構建基因藥物共載體系及制備方法無效
| 申請號: | 201210168122.2 | 申請日: | 2012-05-25 |
| 公開(公告)號: | CN102805873A | 公開(公告)日: | 2012-12-05 |
| 發明(設計)人: | 高立章;劉貴高;原續波;何芳 | 申請(專利權)人: | 天津大學 |
| 主分類號: | A61K48/00 | 分類號: | A61K48/00;A61K31/704;A61K9/10;A61K47/48;A61K47/34;A61K47/02;A61P35/00 |
| 代理公司: | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人: | 王麗 |
| 地址: | 300072 天*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 陽離子 脂質體 形成 納米 構建 基因 藥物 載體 制備 方法 | ||
1.以陽離子性脂質體為模板形成的金納米空心球殼結構的藥物基因共載體系,其特征是:利用陽離子性脂質體載親水性的藥物,在陽離子脂質體外包裹金,形成內部載藥的金納米球殼結構,基因通過巰基接在金納米球殼結構的表面,從而構建內部載藥、外部載基因的金納米球殼共載體系。
2.如權利要求1所述的體系,其特征是所述的藥物為鹽酸阿霉素的親水性抗癌藥物。
3.如權利要求1所述的體系,其特征是所述的基因為所有帶巰基或者可以修飾出巰基的基因。
4.構建權利要求1的金納米空心球殼結構的藥物基因共載體系的的方法,其特征是步驟如下:
a.將二棕櫚酰磷脂酰膽堿和單棕摘酰磷脂酰膽堿按照重量比在1∶1和1∶0之間進行投料,加入修飾有1,2-雙(二苯基膦)乙烷的聚乙二醇2000,1,2-雙(二苯基膦)乙烷的聚乙二醇2000的質量占總質量的5%,將上述物質溶解在磷酸氫鈉-磷酸二氫鈉緩沖溶液,使得磷脂濃度濃度為40-60nM,加入鹽酸阿霉素,使得鹽酸阿霉素濃度為5-10nM。循環冷凍融化,通過100nm的聚碳酸酯膜擠出,形成載藥的陽離子脂質體;取上述制備的脂質體溶液1mL,加入7-18uL濃度為100nM氯金酸溶液,再加入10.5uL-27uL濃度為500nM的抗壞血酸溶液,形成金納米球殼結構;
b.將50nmol的單鏈小干擾RNA(siRNA)在pH=3.8的緩沖溶液中還原得到帶巰基單鏈siRNA,加入到1ml金納米球殼溶液中,在6000rpm條件下離心10分鐘,在30mM羥乙基哌嗪乙硫磺酸100mM、pH=7.5醋酸鈉溶液中重分散三次,形成藥物基因共載的金納米球殼。
5.如權利要求4所述的方法,其特征是所述步驟b.為:直接訂做帶巰基的基因SH-miR-21,將帶巰基的基因溶解在堿性緩沖溶液中,濃度為2umol/L,按照與金納米球殼溶液體積比在64∶1與2∶1的范圍內混合,形成藥物基因共載的金納米球殼。?
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