[發(fā)明專利]堿性磷酸酶標(biāo)記抗體的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210099617.4 | 申請日： | 2012-04-06 |
| 公開（公告）號： | CN102645531A | 公開（公告）日： | 2012-08-22 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李子樵;王志文 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海藍(lán)怡科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/535 | 分類號： | G01N33/535 |
| 代理公司： | 上海精晟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31253 | 代理人： | 何新平 |
| 地址： | 201100*** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 堿性磷酸酶 標(biāo)記 抗體 方法 | ||
1.一種堿性磷酸酶標(biāo)記抗體的方法，采用如下步驟：
A)將5mg堿性磷酸酶溶解在含量為0.5ml濃度為0.05M，PH值為3.6-6.6的NaAc溶液中，使堿性磷酸酶的濃度為3-10mg/ml；
B)向步驟A中的酶溶液內(nèi)加入等體積的過碘酸鈉溶液，并在室溫為4攝氏度的條件下進(jìn)行氧化，氧化時間為20min；
C)向氧化后的酶溶液內(nèi)，加入與步驟A所得溶液等體積的乙二醇-NaCl溶液；
D)向步驟C中的溶液內(nèi)，加入含量為1.5ml的冰冷無水乙醇，混勻，并在室溫為-20℃的條件下靜置1小時，4000g離心10min，得到氧化好的酶；
E)用含量為0.5ml濃度為0.5M，pH值為8-10的碳酸鹽緩沖液溶解沉淀步驟D中得到的酶，并加戊二醛0.1ml，混勻；
F)按質(zhì)量比，酶∶抗體的比例范圍為1∶1至1∶4的比例，加入待標(biāo)記的抗體溶液進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)時間為1-3小時；
G)按質(zhì)量比，NaBH4∶酶的比例范圍為0.1∶1至0.2∶1的比例，加入NaBH4溶液，室溫放置1-3小時；
H)加入0.6ml的冰冷無水乙醇，并在-20℃的室溫下靜置1小時，4000g離心10分鐘；
I)按所需酶標(biāo)抗體濃度用PBS溶解或凍干保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堿性磷酸酶標(biāo)記抗體的方法，其特征在于：所述乙二醇-NaCl溶液的配方為NaCl，乙二醇和水。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的堿性磷酸酶標(biāo)記抗體的方法，其特征在于：所述的NaCl的含量為22g，乙二醇的含量為2.3ml，水的含量100ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堿性磷酸酶標(biāo)記抗體的方法，其特征在于：所述待標(biāo)記的抗體溶液為HbcAb的PBS溶液。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于上海藍(lán)怡科技有限公司，未經(jīng)上海藍(lán)怡科技有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.17sss.com.cn/pat/books/201210099617.4/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 上一篇：短路虛擬架構(gòu)、解內(nèi)嵌的方法及裝置
- 下一篇：一種去皮手套
- 識別結(jié)合了抗原的抗體與沒有結(jié)合抗原的抗體的結(jié)構(gòu)變化的抗體及其獲得方法
- 一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的醫(yī)藥組成物
- 抗CD3抗體、可活化抗CD3抗體、多特異性抗CD3抗體、多特異性可活化抗CD3抗體及其使用方法
- 十色抗體組合物及其在白血病淋巴瘤分型中的應(yīng)用
- 用于鑒定造血細(xì)胞亞型的用途、方法、試劑盒、組合物和抗體
- 基于小世界網(wǎng)絡(luò)搜索的孔群加工路徑優(yōu)化方法
- 一種快速診斷家族性噬血細(xì)胞綜合征3型的試劑盒及其應(yīng)用
- 腫瘤患者免疫細(xì)胞功能評估試劑盒及評估方法
- 自身抗體的定量方法
- 抗體組合物及其篩查髓系疾病及檢測免疫檢查點(diǎn)的應(yīng)用
