【技術領域】

本發明涉及用于檢測作為抗磷脂抗體綜合征的責任抗體之一的狼瘡抗凝物的試劑盒。本發明還涉及判斷從受試者得到的待測樣品中的狼瘡抗凝物的存在與否的方法。

【背景技術】

抗磷脂抗體綜合征(antiphospholipid?syndrome；以下稱之為“APS”)是血中有抗磷脂抗體，呈動靜脈血栓癥及習慣性流死產等的臨床癥狀的疾病組的總稱(參照吉田美香等，日本檢查血液學會雜志.2008、9(1)：69-76)。抗磷脂抗體(antiphospholipid?antibodies；以下稱之為“aPL”)是結合到磷脂、或者，磷脂和蛋白質的復合物的自身抗體的總稱(參照渥美達也、日本血栓止血學會志.2008、19(3)：329-332)。

在aPL中有各種各樣的抗體，根據該抗體識別的磷脂或磷脂結合蛋白質賦予抗體的名稱。在aPL中，可例舉抗心磷脂抗體(anti-cardiolipin?antibodies；aCL)、抗β2糖蛋白I抗體(anti-β2glycoprotein?I?antibodies；aβ2GPI)、磷脂酰絲氨酸依賴性抗凝血酶原抗體(phosphatidylserine-dependent?anti-prothrombin?antibodies；aPS/PT)、狼瘡抗凝物(lupus?anticoagulant；以下也稱為“LA”)。aCL、aβ2GPI、aPS/PT用酶免疫測定法(ELISA)檢測，LA用磷脂依賴性凝固時間的延長檢測(參照家子正裕等，日本血栓止血學會志.2007、18(3)：226-233)。

LA被定義為“不抑制每種凝固因子活性，抑制磷脂依賴性的血液凝固反應的免疫球蛋白”，被認為在磷脂依賴性的凝固反應中抑制磷脂自體的自身抗體。

現在，LA的檢查基準如下：

(1)在測定活化部分促凝血酶原激酶時間(activated?partial?thromboplastin?time：APTT)、稀釋魯塞爾蝰蛇毒時間(dilute?Russel?vipervenom?time：dRVVT)及高嶺土凝固時間(kaolin?clotting?time：KCT)等的磷脂依賴性凝固時間的篩選檢查中確認凝固時間的延長，

(2)即便進行與健康人血漿的混合試驗，凝固時間的延長也不改善，

(3)通過過量的磷脂的添加確認凝固時間的縮短(磷脂依賴性的確認試驗)。

最后，通過除外凝固因子的抑制劑等的明顯的凝固異常、及，肝素等的抗凝固劑的影響，診斷受試者是LA陽性(參照吉田美香等，日本檢查血液學會雜志，2008、9(1)：69-76)。

作為那樣的LA的磷脂依賴性的確認試驗之一，有分別使用以低濃度含磷脂的凝固時間測定試劑及以高濃度含磷脂的凝固時間測定試劑來測定凝固時間，通過基于從各試劑得到的凝固時間的比確認凝固時間磷脂濃度依賴性的延長，確認待測樣品中的LA的存在的方法。

本發明人至今完成了可通過調節試劑中含的磷脂的組成來高靈敏度檢測LA的試劑盒(參照U.S.Patent?Publication?No.2004/0091952，U.S.Patent?Publication?No.2005/0175983，及，特開2006-133002號公報)。

雖然也可根據上述的方法檢測LA，但有即便使用含高濃度的磷脂的試劑也無法確認凝固時間的延長的情況。即，在以往的方法中，有即便是LA陽性待測樣品，凝固時間的比與陰性待測樣品示同程度的值的情況，因此難以明確地區分LA陽性的待測樣品組和陰性的待測樣品組。

【發明內容】

本發明的范圍僅由隨附的權利要求定義，且不以任何程度受此發明內容部分的影響。

本發明人發現，通過使用含堿金屬鹽的凝固時間測定試劑，可抑制由LA的凝固時間的延長，可明確地區分LA陽性的待測樣品組和陰性的待測樣品組，從而完成本發明。

即，本發明是：

(1)狼瘡抗凝物檢測用試劑盒，其包括：

第1凝固時間測定試劑；及

第2凝固時間測定試劑；其中

第1凝固時間測定試劑和第2凝固時間測定試劑之中至少一方含堿金屬鹽。

(2)(1)所述的檢測用試劑盒，其中

上述第1凝固時間測定試劑含堿金屬鹽，

上述第2凝固時間測定試劑含相比上述第1凝固時間測定試劑更低濃度的堿金屬鹽，或者，不含堿金屬鹽。

(3)(1)或(2)所述的檢測用試劑盒，其中