技術領域

本發明涉及一種復合佐劑，具體涉及一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸與氫氧化鋁的復合佐劑，屬于免疫學技術領域。

背景技術

近年來，隨著免疫學研究的不斷深入及基因工程技術的迅速發展，活載體疫苗、DNA疫苗和蛋白質疫苗等新型疫苗的研究取得了可喜的進步。這些新型疫苗純度高、特異性強，但免疫原性弱，誘導機體免疫應答不夠強，因此應用佐劑來增強其免疫原性或增強宿主對抗原免疫應答就顯得尤為重要。

人們在尋找新型佐劑的同時，對常規佐劑的改良研究也更加重視起來。雖已涌現不少新型佐劑，但都處于試驗研究階段。目前在疫苗產業中鋁佐劑是最傳統、最重要也是應用最多的疫苗佐劑。

鋁佐劑的作用機理主要是在組織中形成抗原貯藏庫產生顆粒性抗原，促進抗原遞呈給免疫細胞，使抗原滯留，緩慢釋放，從而吸引活性淋巴細胞，激活補體系統。但作為疫苗佐劑，其靶向性存在缺陷，不能引起機體的特異性細胞免疫應反應。而其他一些正在研究中的已證實有佐劑作用的物質，由于安全性、有效性或經濟方面問題，未能被批準用于人體。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）是生物代謝過程中的一種重要輔酶，其結構式如圖所示（圖1）。它的基本生理功能是維持細胞的生長、分化和能量的代謝，不僅對細胞內的氧化還原狀態具有重要的調節作用，而且常被作為活體內的代謝指標，與細胞的代謝、節律、衰老、病變、死亡等重大生命過程有著極其緊密的聯系。Friedrich?Haag證實NAD是一種細胞內源性危險信號。同時其可作為T細胞的免疫調節分子，誘導鼠類CD4⁺及CD8⁺T細胞的凋亡，但其是否具有佐劑作用尚不明確。

發明內容

為解決現有疫苗佐劑存在毒副作用、價格昂貴等問題，本發明提供一種安全、有效、穩定、便宜的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸與氫氧化鋁的復合佐劑。

本發明還提供一種含有煙酰胺腺嘌呤二核苷酸與氫氧化鋁的復合佐劑的疫苗。

????本發明提供的是這樣一種NAD、氫氧化鋁復合佐劑，其特征在于由下列質量比的組分組成：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸︰氫氧化鋁＝1～5︰50～100。

所述煙酰胺腺嘌呤二核苷酸為市購醫用產品，分子式為C₂₁H₂₆N₇O₁₄P₂，分子量為663.4177，結構式如圖1所示，在人體中的推薦劑量為10～50μg。

所述氫氧化鋁為目前常用的氫氧化鋁膠體佐劑，其制法參照《中國藥典（三部）》，（國家藥典委員會.北京:人民衛生出版社.2005:118-119），在人體中的劑量為1.8～2.7?mg。

本發明提供的是這樣一種含有復合佐劑的疫苗，其特征在于在每100μL抗原液中加入0.51～1.05mg的復合佐劑，且復合佐劑由下列質量比的組分組成：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸︰氫氧化鋁＝1～5︰50～100。

所述抗原液是在每100μL生理鹽水中，混溶有2μg抗原。

所述抗原為常規乙肝表面抗原。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸與氫氧化鋁的復合佐劑誘導的免疫反應為體液免疫反應。

本發明與現有技術相比具有下列優點和效果：（1）本復合佐劑無毒、副作用，不積累毒性，在免疫劑量范圍內使用是安全可靠的；（2）本復合佐劑能夠有效的誘導抗原特異性的體液免疫應答，且其所誘導的體液免疫應答效果優于單一的鋁佐劑及單一的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸；（3）本復合佐劑原料易得，均為市售產品，制備工藝簡單，成本低，性能穩定，可作為乙肝疫苗、蛋白疫苗及病毒疫苗等佐劑；（4）本復合佐劑與疫苗聯合應用能有效增強疫苗體液免疫應答，增強效果優于單一的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸佐劑和單一的氫氧化鋁佐劑。

附圖說明

圖1為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸分子結構式；

圖2為使用實施例1提供的復合佐劑后，14周內，各實驗組小鼠血清抗-HBsIgG抗體水平；

圖3為使用實施例2提供的復合佐劑后，14周內，各實驗組小鼠血清抗-HBsIgG抗體水平；

圖4為使用實施例3提供的復合佐劑后，14周內，各實驗組小鼠血清抗-HBsIgG抗體水平；

圖5為使用實施例4提供的復合佐劑后，14周內，各實驗組小鼠血清抗-HBsIgG抗體水平。

具體實施方式