[發(fā)明專利]一種用于防治棉鈴疫病的短小芽孢桿菌及其微生物菌劑有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210028108.2 | 申請(qǐng)日: | 2012-02-09 |
| 公開(公告)號(hào): | CN102732444A | 公開(公告)日: | 2012-10-17 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 李寶慶;馬平;李社增;鹿秀云;郭慶港 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所 |
| 主分類號(hào): | C12N1/20 | 分類號(hào): | C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/07 |
| 代理公司: | 北京眾合誠(chéng)成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246 | 代理人: | 胡長(zhǎng)遠(yuǎn) |
| 地址: | 071000 *** | 國(guó)省代碼: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 用于 防治 棉鈴 疫病 短小 芽孢 桿菌 及其 微生物 | ||
1.一種短小芽孢桿菌(Bacillus?pumilus)菌株HMB22277,已于2011年12月20日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏編號(hào)為CGMCC?No.5615。
2.利用權(quán)利要求1所述的短小芽孢桿菌HMB22277生產(chǎn)的微生物菌劑,其特征在于其活性成分為短小芽孢桿菌HMB22277菌體和它的胞外代謝產(chǎn)物。
3.按照權(quán)利要求2所述的微生物菌劑,其特征在于為液體制劑。
4.按照權(quán)利要求2所述的微生物菌劑,其特征在于短小芽孢桿菌HMB22277的活菌數(shù)大于8.37×108cfu/mL。
5.權(quán)利要求2所述的微生物菌劑的制備方法,具體包括如下步驟:
(1)將低溫保存的HMB22277菌株在LB平板培養(yǎng)基上活化,挑取單菌落在LB斜面培養(yǎng)基上30℃培養(yǎng)24~36小時(shí),得活化的菌株;
(2)用無菌的接種環(huán)刮取一環(huán)步驟(1)活化的菌株接種到100mL?LB液體培養(yǎng)基中,在26~34℃、,搖床轉(zhuǎn)速為170~210rpm的條件下培養(yǎng)22~25小時(shí),得種子液;
(3)按照體積比為0.5%~3.0%的比例將步驟(2)的種子液接入到蔗糖豆餅粉培養(yǎng)基中,在溫度為28~34℃,搖床轉(zhuǎn)速為170~210rpm的條件下發(fā)酵培養(yǎng)36~54h;所述的蔗糖豆餅粉培養(yǎng)基,其組成成分及其重量百分比為:蔗糖2.0~3.0%,豆餅粉1.6~2.4%,NaCl?0.1~0.2%,CaCO3?0.1~0.3%,KH2PO4?0.01~0.03%和MgSO4·7H2O?0.01~0.03%,其余為水;
(4)檢測(cè)發(fā)酵液中菌體數(shù)量,待發(fā)酵液中成熟芽孢占到芽孢和菌體總數(shù)的90%時(shí),停止發(fā)酵培養(yǎng);所得即為HMB22277菌株的液體制劑。
6.按照權(quán)利要求5所述的制備方法,其特征在于其步驟(3)中所述的溫度為30~32℃。
7.按照權(quán)利要求5所述的制備方法,其特征在于其步驟(3)中所述的搖床轉(zhuǎn)速為210rpm。
8.按照權(quán)利要求5所述的制備方法,其特征在于其步驟(3)中所述的培養(yǎng)時(shí)間為48h。
9.權(quán)利要求1所述的短小芽孢桿菌HMB22277在防治棉鈴疫病上的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求2所述的微生物菌劑在防治棉鈴疫病上的應(yīng)用。
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