技術領域

本發明涉及醫學和生物醫學工程領域，具體涉及含有細胞或者組織的組織工程神經移植物及其用途。

背景技術

現實社會中交通事故、工傷事故、運動意外及臨床手術等事件均會造成周圍神經損傷，臨床上但當中長距離的神經缺損不能依靠端對端的縫合來彌補神經缺失時，就不得不依靠移植物來橋接修復。近年來，基于生命科學與工程學的原理和技術發展起來的組織工程學為構建神經移植替代品提供了一條新的出路。采用組織工程技術修復神經損傷的研究主要集中在設計和構建新的組織工程神經橋接裝置，目前這類橋接物通常是單獨采用生物材料，通過將其加工成管狀結構的神經引導通道，為神經的再生提供適當的空間和引導作用。但對于長距離、粗大神經缺損，這類單純由生物材料組成的導管由于缺乏神經營養因子等微環境物質的支持，取得的修復效果非常有限。這可能是因為長距離神經缺損修復早期，神經斷端內細胞分泌的神經營養因子有限，難以在長距離或較粗的神經導管中發揮作用。目前臨床上自體神經移植仍然是治療這類疾病最好的方法。因為供移植用的自體神經來源有限、產生新的創傷、組織結構和尺寸難以相匹配和移植供區長期失神經支配等原因，導致自體神經移植應用的很大局限性。但自體神經移植治療周圍神經缺損良好的效果提示我們在神經缺損修復中需要有相關細胞提供生物微環境的作用，如果人工神經移植物上含有相關的細胞和組織，將能夠提高缺損神經的修復效果。因此，理想的組織工程人工神經移植物應該包含支架材料、神經營養因子和種子細胞三部分。

中國專利公開號CN1589913公開了一種用于修復周圍神經缺損的組織工程化周圍神經，使用神經膠質細胞或向神經膠質細胞分化的干細胞作為種子細胞，采用生物可降解材料構成的神經導管，同時應用復合有神經營養因子的控制釋放微球，并含有細胞外基質。由于神經干細胞研究起步較晚，目前建立的神經干細胞系絕大多數來源于鼠，而鼠與人之間存在明顯的種屬差異，利若用自體細胞，由于神經干細胞和神經膠質細胞位于中樞神經系統，取材難度非常大。

?發明內容

本發明的目的在于提供一種帶有活細胞或者組織的的殼聚糖人工神經移植物及其用途。

本發明的技術解決方案是：

一種組織工程神經移植物，其特征在于，所述的移植物包括：（a）管狀本體，所述管狀本體是指用殼聚糖加工而成的管壁內分布豐富孔隙的導管，（b）包繞或者分布在所述管狀本體孔隙內和表面的細胞或組織，所述的細胞包括骨髓干細胞、骨隨間沖質干細胞、雪旺細胞或者背跟神經節組織一種或幾種組合。

上述管狀本體為孔隙率50-90%、孔徑50-300μm的具有多孔結構、抗拉強度高的神經導管。

上述管狀本體內徑為0.5-8mm，壁厚0.1-3mm。

上述管狀本體在于是在不添加任何發泡劑、交聯劑的情況下，通過弱酸溶解、注模、冷凍成型、中和固定、清洗、冷凍干燥等工藝制得。在制造過程中，通過改變殼聚糖溶液的濃度來調節導管管壁的孔隙率；通過改變冷凍成型溫度和冷凍速度調節所生成的冰晶大小以控制殼聚糖導管管壁的孔徑；通過改變殼聚糖的乙酰化程度以控制導管的降解速度。

上述組織工程神經移植物包繞或者分布在所述管狀本體孔隙內和表面的細胞或組織密度為1×10⁶-1×10⁸/ml，來源于自體或異體。

上述的組織工程神經移植物用于周圍神經缺損和脊髓損傷，尤其是對粗大神經干長距離的缺損和陳舊性周圍神經缺損。

骨髓干細胞是存在于骨髓中的多能干細胞，包括造血干細胞和間充質干細胞兩類。骨髓間充質干細胞（bone?marrow?mesenchymal?stem?cells，MSCs）是骨髓內造血干細胞以外的非造血干細胞，是造血微環境的重要組成部分。近年來的研究表明MSCs具有全能干細胞的特點，有報道MSCs可跨胚層分化為星形膠質細胞、少突膠質細胞、小膠質細胞、神經細胞、雪旺氏細胞，并表達神經組織細胞表型蛋白如NGF、MAP-2、CNPase、GFAP、OX-42及S100等相關因子，以改善神經再生過程中的微環境。近年來研究顯示，MSCs在體內、外可誘導分化為雪旺氏樣細胞，并可促進周圍神經損傷的修復。研究發現，將MSCs植入硅膠管內，可以促進大鼠及犬坐骨神經再生。