[發明專利]一種角類多肽、其分離方法及抗氧化用途有效
| 申請號: | 201110278430.6 | 申請日: | 2009-10-26 |
| 公開(公告)號: | CN102304170A | 公開(公告)日: | 2012-01-04 |
| 發明(設計)人: | 劉睿;段金廒;錢大瑋;唐于平;郭建明 | 申請(專利權)人: | 南京中醫藥大學 |
| 主分類號: | C07K7/06 | 分類號: | C07K7/06;C07K1/36;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;A61K38/08;A61P39/06 |
| 代理公司: | 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102 | 代理人: | 孫立冰 |
| 地址: | 210029 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 多肽 分離 方法 氧化 用途 | ||
1.具有式II的多肽或其藥學上可接受的鹽:
Tyr-Glu-Asp-Cys-Thr-Asp-Cys-Gly-Asn(II)。
2.權利要求1的多肽的制備方法,包括:
a、取水牛角粉,用純水加熱回流提取,濾過,濾液濃縮冷凍干燥,得粗提物;
b、對粗提物進行凝膠柱層析分離,在254nm下檢測流出樣品,根據檢測器的樣品峰收集每個組分,測定抗氧化活性;
c、將最高抗氧化活性的組分進一步利用DEAE?Sepharose?Fast?Flow陰離子交換柱分離純化,離子交換柱先用50mM磷酸鹽緩沖液pH6.5,以1ml/min流速預處理3h;上樣后,離子交換柱用50mM磷酸鹽緩沖液pH6.5,以1ml/min流速洗脫2h,然后以線性梯度為0-0.3MNaCl的磷酸鹽緩沖液50mM,pH6.5洗脫,洗脫曲線在254nm下檢測;根據洗脫峰收集每個組分,冷凍干燥;
d、將c得到的凍干粉,純水溶解成較高濃度,通過Waters?2545-2489-2676自動純化HPLC系統進行脫鹽,測定抗氧化活性,得到較好抗氧化活性組分D2和D3;
e、將組分D2和D3,再通過Waters?2545-2489-2676自動純化HPLC系統進一步分離純化;以線性梯度為2%-60%甲醇洗脫,其中含0.1%三氟乙酸,在230nm下檢測;D2組分反相HPLC層析分離時,收集保留時間約為7.3min的色譜峰,為多肽II;收集得到的樣品,減壓濃縮除去甲醇后,冷凍干燥;得到多肽II的凍干粉。
3.一種藥物組合物,其中含有權利要求1的多肽或其藥學上可接受的鹽及藥學上可接受的載體。
4.權利要求1的多肽或其藥學上可接受的鹽用于制備抗氧化藥物的用途。
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