技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種菌種的分離培養(yǎng)方法，特別是白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

炭角菌屬有黑柄炭角菌Xylaria?nigripes?(Klotzsch)?Sacc.、痂狀炭角菌Xylaria?escharoidea（Berk.）Sacc.等，黑柄炭角菌中文別名烏靈參、雞茯苓、地炭棍，菌核生長(zhǎng)在廢棄的白蟻窩上。經(jīng)濟(jì)用途：藥用菌核，其性溫，味微苦。民間藥用，能除濕、鎮(zhèn)驚、止心悸，催乳、補(bǔ)腎、安眠的作用。治產(chǎn)后失血，跌打損傷，可與肉燉食，作為補(bǔ)藥。

由于炭角菌生長(zhǎng)環(huán)境的特殊性，其菌種的自然繁殖遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足人們對(duì)該藥源植物的需求，為了解決供需矛盾，人們多采用人工栽培的方法擴(kuò)大藥源，但在人工栽培中，如果以常規(guī)方法育種，菌種產(chǎn)量產(chǎn)值均較低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的即在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它能大大提高白蟻巢上炭角菌屬種產(chǎn)量，杜絕了菌種的病毒危害，保障了菌種的產(chǎn)量和產(chǎn)值。

本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：

（1）白蟻巢的獲取方法

??從生長(zhǎng)蟻巢傘地方挖開(kāi)土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；

（2）炭角菌培養(yǎng)方法

?將獲得的白蟻巢取100～300克，裝入250ml～300?ml的三角瓶?jī)?nèi)，瓶口用塑料薄膜密封；或者將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封袋口；在室內(nèi)25～30℃下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色棒狀子實(shí)體為止；

（3）菌種分離方法

A、培養(yǎng)基a配制：培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制：馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水1000mL；培養(yǎng)基b配制：培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制：酵母粉5g、葡萄糖20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水1000mL；

B、分離方法

將培養(yǎng)出的炭角菌子實(shí)體取出，用70%～75%的酒精棉球擦洗子實(shí)體表面，然后在無(wú)菌環(huán)境下將子實(shí)體折斷，手術(shù)刀在酒精燈火焰上灼燒殺菌并冷卻后，切取子實(shí)體內(nèi)部組織，放在培養(yǎng)基a或培養(yǎng)基b上；

（4）菌種培養(yǎng)方法

?將放入子實(shí)體組織塊的培養(yǎng)基，在22℃～25℃下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色子實(shí)體為止，將形成黑色子實(shí)體的菌種，確定為炭角菌屬菌種，選擇無(wú)細(xì)菌和霉菌感染的菌種使用；

（5）菌種保藏

將菌種用紙包裹，在室內(nèi)20℃～30℃下保藏，間隔2～3個(gè)月轉(zhuǎn)接培養(yǎng)一次。

通過(guò)上面的敘述可以看出，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：利用本發(fā)明的分離培養(yǎng)方法，菌種具有不受地區(qū)、季節(jié)與氣候限制，便于工廠化生產(chǎn)等優(yōu)勢(shì)，大大提高了白蟻巢上炭角菌屬種產(chǎn)量，保障了菌種的產(chǎn)值。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述：

實(shí)施例1：一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：

（1）白蟻巢的獲取方法

??從生長(zhǎng)蟻巢傘地方挖開(kāi)土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；

（2）炭角菌培養(yǎng)方法

?將獲得的白蟻巢取100克，裝入250ml的三角瓶?jī)?nèi)，瓶口用塑料薄膜密封；或者將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封袋口；在室內(nèi)25℃下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色棒狀子實(shí)體為止；

（3）菌種分離方法

A、培養(yǎng)基配制：培養(yǎng)基a配制：培養(yǎng)基按以下組分及重量比配制：馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g，按以上比例稱取，然后加入水1000mL；

B、分離方法

將培養(yǎng)出的炭角菌子實(shí)體取出，用70%的酒精棉球擦洗子實(shí)體表面，然后在無(wú)菌環(huán)境下將子實(shí)體折斷，在酒精燈火焰上灼燒殺菌并冷卻后，切取子實(shí)體內(nèi)部組織，放在培養(yǎng)基上；

（4）菌種培養(yǎng)方法

?將放入子實(shí)體組織塊的培養(yǎng)基，在22℃下培養(yǎng)，培養(yǎng)至形成黑色子實(shí)體為止，將形成黑色子實(shí)體的菌種，確定為炭角菌屬菌種，選擇無(wú)細(xì)菌和霉菌感染的菌種使用；

（5）菌種保藏

將菌種用紙包裹，在室內(nèi)20℃下保藏，間隔2個(gè)月轉(zhuǎn)接培養(yǎng)一次。

實(shí)施例2：一種白蟻巢上炭角菌屬種的分離培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：

（1）白蟻巢的獲取方法

??從生長(zhǎng)蟻巢傘地方挖開(kāi)土壤，從中取出白蟻巢，將白蟻巢裝入塑料袋內(nèi)，密封保藏；

（2）炭角菌培養(yǎng)方法