技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，是紫草素作為抗真菌藥物增效劑的新用途。

背景技術

唑類(包括咪唑類、三唑類)及多烯類等抗真菌藥物是臨床上常用的能有效治療深部及淺表部真菌感染的抗真菌藥，如咪唑類中的酮康唑、克霉唑、咪康唑、益康唑等；三唑類中的氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑等；多烯類中的兩性霉素B等。但由于眾所周知的原因，臨床上的耐藥菌株越來越普遍，致使不得不加大用藥劑量，某些抗真菌藥物甚至加大用藥量也無效。加大用藥劑量必然會增加毒副作用，尤其如酮康唑等對肝臟或心臟有毒副作用的藥物，從而限制了這些藥物在臨床上的應用。

紫草素(shikonin)，又名5，8-二羥基-2-[(1R)-1-羥基-4-甲基戊-3-烯基]萘-1，4-二酮，來源于紫草科植物紫草的根，其結構如式(I)所示。

藥理實驗表明，紫草素具有多種生物學活性，如抗炎、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抗生育、抗甲狀腺低下、降血糖及保肝護肝等。但至今未見紫草素可作為唑類或多烯類等抗真菌藥物增效劑的報道。

發明內容

本發明的目的是對紫草素提供一種作為抗真菌藥物增效劑的新用途。所說的抗真菌藥物是唑類或多烯類等抗真菌藥物，紫草素的用量為在抗真菌藥物有效濃度中加入1～16μg/ml，優選用量為2μg/ml～4μg/ml。例如，在每毫升含氟康唑、酮康唑、咪康唑或兩性霉素B0.0125～0.5微克的液體制劑中，加入紫草素1～16微克；或者在每毫克含氟康唑、酮康唑、咪康唑或兩性霉素B?0.0125～0.5微克的固體制劑中加入紫草素1～16微克。

經實驗證明，當抗真菌藥物與紫草素合用時，紫草素能降低抗真菌藥物的用藥劑量，不僅能在減少抗真菌藥物用藥量的情況下同樣確保其對淺表部或深部真菌感染的治療效果，而且對于臨床分離的耐藥性菌株或實驗室誘導的耐藥性菌株均具有明顯的增效作用，還能使已被認為治療無效的抗真菌藥物恢復對耐藥真菌的作用。因此紫草素可用作抗真菌藥物的增效劑，用于不同深部或淺表真菌感染的治療。

本發明為紫草素開辟了一種新用途，作為抗真菌藥物的增效劑，可降低唑類或多烯類抗真菌藥物的用藥劑量，從而減輕了藥物的毒副作用，特別是氟康唑、酮康唑、咪康唑及兩性霉素B等。尤其是紫草素作為抗真菌藥物的增效劑，使抗真菌藥物恢復對耐藥真菌的作用，有效治療真菌感染特別是耐藥性真菌感染，具有重要的臨床應用價值。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步說明，但本發明的保護范圍不限于實施例。

實施例1：紫草素和氟康唑合用對不同臨床真菌株的作用。

材料和方法

1.試藥：

紫草素：中國藥品生物制品檢定所(下同)。

氟康唑：輝瑞制藥有限公司(下同)。

二甲亞砜：中國醫藥(集團)上海化學試劑公司。

紫草素的濃度為8mg/ml，氟康唑的濃度為2mg/ml，受試藥物于-20℃保存。實驗前，將藥物貯存液取出置35℃溫箱融化，充分混勻，分別進行藥效學試驗。

2.菌株：

白念珠菌、克柔氏念珠菌和羊毛狀小孢子菌臨床株，由上海長海醫院真菌室提供，均經形態學和生化學鑒定。

所有實驗用菌株均于沙堡葡萄糖瓊脂培養基(SDA)劃板活化，于35℃培養1周后，分別挑取單克隆再次劃板活化，取第二次所得單克隆置SDA斜面，用上述方法培養后于4℃保存備用。

3.培養液：

RPMI?1640培養液：RPMI?1640(Gibco?BRL公司)10.0g，NaHCO₃?2.0g，嗎啡啉丙磺酸(Sigma)34.5g，加三蒸水900ml溶解，1N?NaOH調pH至7.0，定容至1000ml，濾過消毒，4℃保存。

沙堡葡萄糖瓊脂(SDA)培養基：蛋白胨10g，葡萄糖40g，瓊脂18g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，調整pH至7.0，定容至1000ml，高壓滅菌后4℃保存。

YEPD培養液：酵母浸膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，加三蒸水900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，定容至1000ml，高壓滅菌后4℃保存。

4.儀器：

隔水式電熱恒溫培養箱(上海躍進醫療器械廠)；

THZ-82A臺式恒溫振蕩器(上海躍進醫療器械廠)；

511型酶標分析儀(上海第三分析儀器廠)；

5.菌液制備：

(1)念珠菌菌液