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[發明專利]用于增加多肽穩定性和活性的組合物及相關方法無效

專利信息
申請號: 201080061040.7 申請日: 2010-11-19
公開(公告)號: CN102858962A 公開(公告)日: 2013-01-02
發明(設計)人: 奧樂福·卡雷;卡德里·阿特瑪;蒂納·卡雷 申請(專利權)人: 索利斯拜歐代因公司
主分類號: C12N9/00 分類號: C12N9/00;C07K14/00;C07K19/00
代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262 代理人: 申基成;楊淑媛
地址: 愛沙尼*** 國省代碼: 愛沙尼亞;EE
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 用于 增加 多肽 穩定性 活性 組合 相關 方法
【權利要求書】:

1.一種增強多肽穩定性的方法,包括提供具有與SEQ?ID?NO:1至少70%相同的氨基酸序列的肽標簽。

2.根據權利要求1所述的方法,其中所述肽標簽具有如SEQ?IDNO:1、SEQ?ID?NO:13、SEQ?ID?NO:14、SEQ?ID?NO:16或SEQ?ID?NO:18所示的氨基酸序列。

3.根據權利要求1所述的方法,其中所述肽標簽由SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO:15、SEQ?ID?NO:17或SEQ?ID?NO:19所示的核酸序列編碼。

4.根據權利要求1所述的方法,其中所述肽標簽包含至少一至六個組氨酸殘基。

5.根據權利要求1所述的方法,其中所述肽標簽包含蛋白酶酶切位點。

6.根據權利要求1所述的方法,其中所述蛋白酶酶切位點包含氨基酸序列DDDDK。

7.根據權利要求1所述的方法,其中所述肽標簽在-20℃至50℃的溫度下抑制多肽的降解或變性。

8.根據權利要求1所述的方法,其中所述肽標簽在-20℃至50℃的溫度下抑制多肽的蛋白質功能喪失。

9.根據權利要求8所述的方法,其中所述多肽在暴露于所述溫度后的蛋白質功能是所述多肽在暴露于所述溫度前的蛋白質功能的至少50%。

10.根據權利要求1所述的方法,其中所述肽標簽在-20℃至50℃的溫度下維持所述多肽的穩定性至少一天。

11.根據權利要求1所述的方法,其中所述肽標簽與所述多肽相連接。

12.根據權利要求11所述的方法,其中所述肽標簽與所述多肽共價連接。

13.根據權利要求11所述的方法,其中所述肽標簽與所述多肽非共價連接。

14.根據權利要求11所述的方法,其中所述肽標簽與所述多肽的氨基末端相連接。

15.根據權利要求11所述的方法,其中所述肽標簽與所述多肽的羰基末端相連接。

16.根據權利要求11所述的方法,其中所述多肽是促紅細胞生成素、人白血病抑制因子(hLIF)、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、胰島素、血管內皮生長因子(VEGF)、瘦素或貝伐珠單抗。

17.根據權利要求16所述的方法,其中所述多肽包含至少一個突變。

18.根據權利要求11所述的方法,其中與所述多肽連接的所述肽標簽具有如SEQ?ID?NO:6、SEQ?ID?NO:8、SEQ?ID?NO:11、SEQ?IDNO:20或SEQ?ID?NO:22所示的氨基酸序列。

19.根據權利要求11所述的方法,其中與所述多肽連接的所述肽標簽由如SEQ?ID?NO:5、SEQ?ID?NO:7、SEQ?ID?NO:12、SEQ?ID?NO:21或SEQ?ID?NO:23所示的核酸序列編碼。

20.根據權利要求11所述的方法,其中所述多肽是熱穩定的蛋白質或酶。

21.根據權利要求20所述的方法,其中所述酶是聚合酶、逆轉錄酶、核酸酶、焦磷酸酶、脫氨酶或蛋白酶。

22.根據權利要求21所述的方法,其中所述聚合酶是DNA聚合酶I、水生棲熱菌DNA聚合酶I(Taq)、Thermococcus?gorgonarius?DNA聚合酶(Tgo)、嗜熱棲熱菌(Tth)DNA聚合酶或ZO5?DNA聚合酶。

23.根據權利要求21所述的方法,其中所述焦磷酸酶是嗜酸熱原體焦磷酸酶(TAPP)。

24.根據權利要求21所述的方法,其中所述脫氨酶是超嗜熱火球菌dCTP脫氨酶。

25.根據權利要求20所述的方法,其中所述熱穩定的蛋白質是裝飾肽或多肽。

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